Nature.com ஐப் பார்வையிட்டதற்கு நன்றி.நீங்கள் பயன்படுத்தும் உலாவி பதிப்பில் CSS ஆதரவு குறைவாக உள்ளது.சிறந்த அனுபவத்திற்கு, புதுப்பிக்கப்பட்ட உலாவியைப் பயன்படுத்துமாறு பரிந்துரைக்கிறோம் (அல்லது Internet Explorer இல் இணக்கத்தன்மை பயன்முறையை முடக்கவும்).இதற்கிடையில், தொடர்ந்து ஆதரவை உறுதிப்படுத்த, தளத்தை ஸ்டைல்கள் மற்றும் ஜாவாஸ்கிரிப்ட் இல்லாமல் வழங்குவோம்.
டோக்ஸோபிளாஸ்மா கோண்டி என்பது ஒரு உள்செல்லுலார் புரோட்டோசோவான் ஒட்டுண்ணியாகும், இது பாதிக்கப்பட்ட ஹோஸ்டின் நுண்ணிய சூழலை மாற்றியமைக்கிறது மற்றும் மூளைக் கட்டி வளர்ச்சியின் நிகழ்வுகளுடன் தொடர்புடையதாக அறியப்படுகிறது.இந்த ஆய்வில், டோக்ஸோபிளாஸ்மா நோய்த்தொற்றிலிருந்து வரும் எக்ஸோசோமல் மைஆர்என்ஏ-21 மூளைக் கட்டி வளர்ச்சியை ஊக்குவிக்கிறது என்று நாங்கள் கருதுகிறோம்.டோக்ஸோபிளாஸ்மா-பாதிக்கப்பட்ட BV2 மைக்ரோக்லியாவிலிருந்து எக்ஸோசோம்கள் வகைப்படுத்தப்பட்டன மற்றும் U87 க்ளியோமா செல்களின் உள்மயமாக்கல் உறுதி செய்யப்பட்டது.டோக்ஸோபிளாஸ்மா கோண்டி மற்றும் கட்டி வரிசைப்படுத்துதலுடன் தொடர்புடைய மைக்ரோஆர்என்ஏ மற்றும் மைக்ரோஆர்என்ஏ-21 ஏ-5பி ஆகியவற்றின் வரிசைகளைப் பயன்படுத்தி எக்ஸோசோமல் மைக்ரோஆர்என்ஏ வெளிப்பாடு சுயவிவரங்கள் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன.எக்சோசோம்களில் miR-21 அளவுகளை மாற்றுவதன் மூலம் U87 க்ளியோமா செல்களில் கட்டி-தொடர்புடைய மரபணுக்களின் mRNA அளவையும் மனித U87 க்ளியோமா செல் பெருக்கத்தில் எக்ஸோசோம்களின் தாக்கத்தையும் ஆராய்ந்தோம்.டோக்ஸோபிளாஸ்மா கோண்டியால் பாதிக்கப்பட்ட U87 க்ளியோமா செல்களின் எக்ஸோசோம்களில், மைக்ரோஆர்என்ஏ-21 இன் வெளிப்பாடு அதிகரிக்கிறது மற்றும் ஆன்டிடூமர் மரபணுக்களின் (FoxO1, PTEN மற்றும் PDCD4) செயல்பாடு குறைக்கப்படுகிறது.டோக்ஸோபிளாஸ்மாவால் பாதிக்கப்பட்ட BV2-பெறப்பட்ட எக்ஸோசோம்கள் U87 க்ளியோமா செல்களின் பெருக்கத்தைத் தூண்டுகின்றன.எக்சோசோம்கள் மவுஸ் கட்டி மாதிரியில் U87 செல்களின் வளர்ச்சியைத் தூண்டுகின்றன.டோக்ஸோபிளாஸ்மா-பாதிக்கப்பட்ட BV2 மைக்ரோக்லியாவில் அதிகரித்த எக்ஸோசோமல் miR-21, ஆன்டிடூமர் மரபணுக்களைக் குறைப்பதன் மூலம் U87 க்ளியோமா செல்களில் உயிரணு வளர்ச்சி ஊக்குவிப்பாளராக முக்கியப் பங்கு வகிக்கலாம் என்று நாங்கள் பரிந்துரைக்கிறோம்.
2018 ஆம் ஆண்டில் உலகளவில் 18.1 மில்லியனுக்கும் அதிகமான மேம்பட்ட புற்றுநோய்கள் கண்டறியப்பட்டதாக மதிப்பிடப்பட்டுள்ளது, ஒவ்வொரு ஆண்டும் சுமார் 297,000 மத்திய நரம்பு மண்டலக் கட்டிகள் கண்டறியப்படுகின்றன (அனைத்து கட்டிகளிலும் 1.6%)1.மனித மூளைக் கட்டிகளை வளர்ப்பதற்கான ஆபத்து காரணிகளில் பல்வேறு இரசாயன பொருட்கள், குடும்ப வரலாறு மற்றும் தலை சிகிச்சை மற்றும் கண்டறியும் கருவிகளில் இருந்து அயனியாக்கும் கதிர்வீச்சு ஆகியவை அடங்கும் என்று முந்தைய ஆராய்ச்சி காட்டுகிறது.இருப்பினும், இந்த நோய்களுக்கான சரியான காரணம் தெரியவில்லை.உலகம் முழுவதும் உள்ள அனைத்து புற்றுநோய்களிலும் சுமார் 20% வைரஸ்கள், பாக்டீரியாக்கள் மற்றும் ஒட்டுண்ணிகள் உட்பட தொற்று முகவர்களால் ஏற்படுகின்றன3,4.தொற்று நோய்க்கிருமிகள் டிஎன்ஏ பழுது மற்றும் செல் சுழற்சி போன்ற ஹோஸ்ட் செல்லின் மரபணு வழிமுறைகளை சீர்குலைத்து, நாள்பட்ட அழற்சி மற்றும் நோயெதிர்ப்பு மண்டலத்திற்கு சேதம் விளைவிக்கும்5.
மனித புற்றுநோயுடன் தொடர்புடைய தொற்று முகவர்கள் மனித பாப்பிலோமா வைரஸ்கள் மற்றும் ஹெபடைடிஸ் பி மற்றும் சி வைரஸ்கள் உட்பட மிகவும் பொதுவான வைரஸ் நோய்க்கிருமிகளாகும்.மனித புற்றுநோயின் வளர்ச்சியில் ஒட்டுண்ணிகள் ஒரு சாத்தியமான பாத்திரத்தை வகிக்க முடியும்.Schistosoma, Opishorchis viverrini, O. felineus, Clonorchis sinensis மற்றும் Hymenolepis nana போன்ற பல ஒட்டுண்ணி இனங்கள், பல்வேறு வகையான மனித புற்றுநோய் 6,7,8 ஆகியவற்றில் உட்படுத்தப்பட்டுள்ளன.
டோக்ஸோபிளாஸ்மா கோண்டி என்பது ஒரு உள்செல்லுலார் புரோட்டோசோவான் ஆகும், இது பாதிக்கப்பட்ட ஹோஸ்ட் செல்களின் நுண்ணிய சூழலை ஒழுங்குபடுத்துகிறது.இந்த ஒட்டுண்ணியானது உலக மக்கள்தொகையில் தோராயமாக 30% மக்களைத் தாக்கும் என மதிப்பிடப்பட்டுள்ளது, இதனால் ஒட்டுமொத்த மக்கள்தொகை 9,10 ஆபத்தில் உள்ளது.டோக்ஸோபிளாஸ்மா கோண்டி, மத்திய நரம்பு மண்டலம் (சிஎன்எஸ்) உட்பட முக்கிய உறுப்புகளை பாதிக்கலாம் மற்றும் ஆபத்தான மூளைக்காய்ச்சல் மற்றும் மூளையழற்சி போன்ற தீவிர நோய்களை ஏற்படுத்தும், குறிப்பாக நோயெதிர்ப்பு குறைபாடுள்ள நோயாளிகளுக்கு9.இருப்பினும், டோக்ஸோபிளாஸ்மா கோண்டி நோயெதிர்ப்பு திறன் இல்லாத நபர்களில் உயிரணு வளர்ச்சி மற்றும் நோயெதிர்ப்பு மறுமொழிகளை மாற்றியமைப்பதன் மூலம் பாதிக்கப்பட்ட ஹோஸ்டின் சூழலை மாற்றலாம், இது அறிகுறியற்ற நாள்பட்ட நோய்த்தொற்றின் பராமரிப்புக்கு வழிவகுக்கும்.சுவாரஸ்யமாக, T. gondii பரவல் மற்றும் மூளைக் கட்டி நிகழ்வுகளுக்கு இடையே உள்ள தொடர்பைக் கருத்தில் கொண்டு, சில அறிக்கைகள் vivo ஹோஸ்டில் நாள்பட்ட T. gondii தொற்று காரணமாக ஏற்படும் சுற்றுச்சூழல் மாற்றங்கள் கட்டி நுண்ணிய சூழலை ஒத்திருப்பதாகக் கூறுகின்றன.
எக்ஸோசோம்கள் அண்டை செல்களிலிருந்து புரதங்கள் மற்றும் நியூக்ளிக் அமிலங்கள் உட்பட உயிரியல் உள்ளடக்கத்தை வழங்கும் இன்டர்செல்லுலர் கம்யூனிகட்டர்கள் என அறியப்படுகின்றன16,17.எக்ஸோசோம்கள் கட்டி நுண்ணிய சூழலில் ஆன்டி-அபோப்டோசிஸ், ஆஞ்சியோஜெனெசிஸ் மற்றும் மெட்டாஸ்டாஸிஸ் போன்ற கட்டி தொடர்பான உயிரியல் செயல்முறைகளை பாதிக்கலாம்.குறிப்பாக, மைஆர்என்ஏக்கள் (மைஆர்என்ஏக்கள்), 22 நியூக்ளியோடைடுகள் நீளமுள்ள சிறிய குறியீட்டு அல்லாத ஆர்என்ஏக்கள், முக்கியமான பிந்தைய டிரான்ஸ்கிரிப்ஷனல் ஜீன் ரெகுலேட்டர்கள், அவை மைஆர்என்ஏ-தூண்டப்பட்ட சைலன்சிங் காம்ப்ளக்ஸ் (மைஆர்என்ஏ) மூலம் 30%க்கும் அதிகமான மனித எம்ஆர்என்ஏவைக் கட்டுப்படுத்துகின்றன.டோக்ஸோபிளாஸ்மா கோண்டி பாதிக்கப்பட்ட ஹோஸ்ட்களில் மைஆர்என்ஏ வெளிப்பாட்டைக் கட்டுப்படுத்துவதன் மூலம் உயிரியல் செயல்முறைகளை சீர்குலைக்கும்.ஒட்டுண்ணியின் உயிர்வாழும் உத்தியை அடைவதற்காக ஹோஸ்ட் உயிரியல் செயல்முறைகளை ஒழுங்குபடுத்துவதற்கான முக்கியமான சமிக்ஞைகளை ஹோஸ்ட் மைஆர்என்ஏக்கள் கொண்டிருக்கின்றன.இவ்வாறு, T. gondii நோய்த்தொற்றின் போது புரவலன் miRNA சுயவிவரத்தில் ஏற்படும் மாற்றங்களைப் படிப்பது, புரவலன் மற்றும் T. gondii இடையேயான தொடர்புகளை இன்னும் தெளிவாகப் புரிந்துகொள்ள உதவும்.உண்மையில், திருஞானம் மற்றும் பலர்.15 கட்டி வளர்ச்சியுடன் தொடர்புடைய குறிப்பிட்ட ஹோஸ்ட் மைஆர்என்ஏக்களில் அதன் வெளிப்பாட்டை மாற்றுவதன் மூலம் டி.கோண்டி மூளை புற்றுநோயை ஊக்குவிக்கிறது மற்றும் டி.
டோக்ஸோபிளாஸ்மா BV2 நோயால் பாதிக்கப்பட்ட ஹோஸ்ட் மைக்ரோக்லியாவில் எக்ஸோசோமல் miR-21 இன் மாற்றத்தில் இந்த ஆய்வு கவனம் செலுத்துகிறது.அதிகப்படியான அழுத்தப்பட்ட miR-21 இன் இலக்கான FoxO1/p27 இன் கருவில் தக்கவைப்பதன் காரணமாக U87 க்ளியோமா செல்களின் வளர்ச்சியில் மாற்றப்பட்ட எக்ஸோசோமல் miR-21 இன் சாத்தியமான பங்கை நாங்கள் கவனித்தோம்.
BV2 இலிருந்து பெறப்பட்ட எக்சோசோம்கள் வேறுபட்ட மையவிலக்கத்தைப் பயன்படுத்தி பெறப்பட்டன மற்றும் செல்லுலார் கூறுகள் அல்லது பிற வெசிகல்களால் மாசுபடுவதைத் தடுக்க பல்வேறு முறைகளால் சரிபார்க்கப்பட்டது.SDS-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) ஆனது BV2 செல்கள் மற்றும் எக்ஸோசோம்களிலிருந்து பிரித்தெடுக்கப்பட்ட புரதங்களுக்கிடையே தனித்துவமான வடிவங்களைக் காட்டியது (படம் 1A), மற்றும் மாதிரிகள் Alix இன் இருப்புக்காக மதிப்பிடப்பட்டன.அலிக்ஸ் லேபிளிங் எக்ஸோசோம் புரதங்களில் காணப்பட்டது ஆனால் BV2 செல் லைசேட் புரதங்களில் இல்லை (படம் 1B).கூடுதலாக, BV2 இலிருந்து பெறப்பட்ட எக்ஸோசோம்களில் இருந்து சுத்திகரிக்கப்பட்ட RNA ஒரு பயோஅனாலைசரைப் பயன்படுத்தி பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டது.18S மற்றும் 28S ரைபோசோமால் துணைக்குழுக்கள் எக்ஸோசோமல் RNA இடம்பெயர்வு முறையில் அரிதாகவே காணப்பட்டன, இது நம்பகமான தூய்மையைக் குறிக்கிறது (படம் 1C).இறுதியாக, டிரான்ஸ்மிஷன் எலக்ட்ரான் நுண்ணோக்கி, கவனிக்கப்பட்ட எக்ஸோசோம்கள் 60-150 nm அளவுள்ளதாகவும், எக்ஸோசோம் உருவ அமைப்பில் (படம் 1D) பொதுவான ஒரு கோப்பை போன்ற அமைப்பைக் கொண்டிருப்பதாகவும் காட்டியது.
BV2 கலங்களிலிருந்து பெறப்பட்ட எக்சோசோம்களின் சிறப்பியல்பு.(A) பாதுகாப்பு தரவு தாள் பக்கம்.புரதங்கள் BV2 செல்கள் அல்லது BV2 இலிருந்து பெறப்பட்ட எக்சோசோம்களிலிருந்து தனிமைப்படுத்தப்பட்டன.புரத வடிவங்கள் செல்கள் மற்றும் எக்சோசோம்களுக்கு இடையில் வேறுபடுகின்றன.(ஆ) எக்ஸோசோமல் மார்க்கரின் வெஸ்டர்ன் பிளட் பகுப்பாய்வு (அலிக்ஸ்).(C) BV2 செல்கள் மற்றும் BV2 பெறப்பட்ட எக்சோசோம்களில் இருந்து சுத்திகரிக்கப்பட்ட ஆர்என்ஏவை பயோஅனாலைசரைப் பயன்படுத்தி மதிப்பீடு செய்தல்.எனவே, BV2 கலங்களில் உள்ள 18S மற்றும் 28S ரைபோசோமால் துணைக்குழுக்கள் எக்ஸோசோமால் ஆர்என்ஏவில் அரிதாகவே காணப்பட்டன.(D) டிரான்ஸ்மிஷன் எலக்ட்ரான் நுண்ணோக்கி BV2 கலங்களிலிருந்து தனிமைப்படுத்தப்பட்ட எக்ஸோசோம்கள் 2% யுரேனைல் அசிடேட்டுடன் எதிர்மறையாக படிந்திருப்பதைக் காட்டியது.எக்சோசோம்கள் தோராயமாக 60-150 nm அளவு மற்றும் கோப்பை வடிவில் இருக்கும் (பாடல் மற்றும் ஜங், வெளியிடப்படாத தரவு).
கன்ஃபோகல் மைக்ரோஸ்கோபியைப் பயன்படுத்தி U87 மனித க்ளியோமா செல்களில் BV2-பெறப்பட்ட எக்சோசோம்களின் செல்லுலார் உள்மயமாக்கல் காணப்பட்டது.PKH26 என்று பெயரிடப்பட்ட எக்ஸோசோம்கள் U87 செல்களின் சைட்டோபிளாஸில் உள்ளமைக்கப்படுகின்றன.கருக்கள் DAPI (படம் 2A) உடன் படிந்துள்ளன, இது BV2-பெறப்பட்ட எக்சோசோம்களை ஹோஸ்ட் செல்கள் மூலம் உள்வாங்கலாம் மற்றும் பெறுநரின் செல்களின் சூழலை பாதிக்கலாம் என்பதைக் குறிக்கிறது.
BV2-பெறப்பட்ட எக்சோசோம்களை U87 க்ளியோமா செல்கள் மற்றும் BV2-பெறப்பட்ட எக்ஸோசோம்கள் டோக்ஸோபிளாஸ்மா RH-ல் பாதிக்கப்பட்ட U87 க்ளியோமா செல்கள் பெருக்கத்தை ஏற்படுத்தியது.(A) கன்ஃபோகல் மைக்ரோஸ்கோபி மூலம் அளவிடப்படும் U87 கலங்களால் எக்ஸோசோம்கள்.U87 க்ளியோமா செல்கள் PKH26 (சிவப்பு) என்று பெயரிடப்பட்ட எக்ஸோசோம்களுடன் அல்லது 24 மணிநேரம் கட்டுப்பாடு இல்லாமல் அடைக்கப்பட்டுள்ளன.கருக்கள் DAPI (நீலம்) மூலம் கறைபட்டு பின்னர் ஒரு கன்ஃபோகல் நுண்ணோக்கியின் கீழ் காணப்பட்டன (ஸ்கேல் பார்: 10 μm, x 3000).(B) U87 க்ளியோமா செல் பெருக்கம் செல் பெருக்க மதிப்பீட்டால் தீர்மானிக்கப்பட்டது.U87 க்ளியோமா செல்கள் சுட்டிக்காட்டப்பட்ட நேரத்திற்கு எக்சோசோம்களுடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்டன. *P <0.05 மாணவர்களின் t சோதனை மூலம் பெறப்பட்டது. *P <0.05 மாணவர்களின் t சோதனை மூலம் பெறப்பட்டது. *P <0,05 по t-критерию Стьюдента. மாணவர்களின் டி-டெஸ்ட் மூலம் *பி <0.05. *P <0.05 通过学生t 检验获得。 *பி <0.05 * P <0,05, полученный с помощью t-критерия Стьюдента. * பி <0.05 மாணவர்களின் டி-டெஸ்ட் மூலம் பெறப்பட்டது.
U87 க்ளியோமா செல்களில் BV2-பெறப்பட்ட எக்ஸோசோம்களின் உள்மயமாக்கலை உறுதிசெய்த பிறகு, மனித க்ளியோமா செல்களின் வளர்ச்சியில் BV2-பெறப்பட்ட டோக்ஸோபிளாஸ்மா-பெறப்பட்ட எக்ஸோசோம்களின் பங்கை ஆராய்வதற்காக செல் பெருக்க மதிப்பீடுகளைச் செய்தோம்.T. gondii-பாதிக்கப்பட்ட BV2 உயிரணுக்களிலிருந்து U87 செல்கள் சிகிச்சையானது, T. gondii-பாதிக்கப்பட்ட BV2-பெறப்பட்ட எக்ஸோசோம்கள் கட்டுப்பாட்டுடன் ஒப்பிடும்போது U87 செல்களின் கணிசமாக அதிகப் பெருக்கத்தை ஏற்படுத்தியதைக் காட்டுகிறது (படம். 2B).
கூடுதலாக, U118 செல்களின் வளர்ச்சி U87 போன்ற அதே முடிவுகளைக் கொண்டிருந்தது, டோக்ஸோபிளாஸ்மா தூண்டப்பட்ட எக்ஸோசோம்கள் அதிக அளவு பெருக்கத்தை ஏற்படுத்தியதால் (தரவு காட்டப்படவில்லை).இந்தத் தரவுகளின் அடிப்படையில், க்ளியோமா செல் பெருக்கத்தில் BV2-பெறப்பட்ட டோக்ஸோபிளாஸ்மா-பாதிக்கப்பட்ட எக்ஸோசோம்கள் முக்கியப் பங்கு வகிக்கின்றன என்பதைக் குறிப்பிடலாம்.
கட்டி வளர்ச்சியில் டோக்ஸோபிளாஸ்மா-பாதிக்கப்பட்ட பிவி2-பெறப்பட்ட எக்ஸோசோம்களின் தாக்கத்தை ஆராய, சினோகிராஃப்ட் மாதிரிக்காக U87 க்ளியோமா செல்களை நிர்வாண எலிகளுக்குள் செலுத்தி, BV2-பெறப்பட்ட எக்ஸோசோம்கள் அல்லது RH-பாதிக்கப்பட்ட BV2-பெறப்பட்ட எக்ஸோசோம்களை செலுத்தினோம்.1 வாரத்திற்குப் பிறகு கட்டிகள் தெளிவாகத் தெரிந்த பிறகு, 5 எலிகளைக் கொண்ட ஒவ்வொரு சோதனைக் குழுவும் அதே தொடக்கப் புள்ளியைத் தீர்மானிக்க கட்டியின் அளவைப் பொறுத்து பிரிக்கப்பட்டது, மேலும் கட்டியின் அளவு 22 நாட்களுக்கு அளவிடப்பட்டது.
U87 சினோகிராஃப்ட் மாதிரியுடன் கூடிய எலிகளில், BV2-பெறப்பட்ட RH- பாதிக்கப்பட்ட எக்சோசோம் குழுவில் 22 ஆம் நாள் (படம். 3A,B) கணிசமாக பெரிய கட்டி அளவு மற்றும் எடை காணப்பட்டது.மறுபுறம், BV2-பெறப்பட்ட எக்சோசோம் குழுவிற்கும் எக்ஸோசோம் சிகிச்சைக்குப் பிறகு கட்டுப்பாட்டுக் குழுவிற்கும் இடையே கட்டி அளவில் குறிப்பிடத்தக்க வேறுபாடு இல்லை.கூடுதலாக, க்ளியோமா செல்கள் மற்றும் எக்ஸோசோம்கள் மூலம் செலுத்தப்பட்ட எலிகள் RH-பாதிக்கப்பட்ட BV2-பெறப்பட்ட எக்சோசோம்களின் குழுவில் (படம் 3C) மிகப்பெரிய கட்டி அளவைக் காட்சிப்படுத்தியது.இந்த முடிவுகள் BV2-பெறப்பட்ட டோக்ஸோபிளாஸ்மா-பாதிக்கப்பட்ட எக்ஸோசோம்கள் ஒரு சுட்டி கட்டி மாதிரியில் க்ளியோமா வளர்ச்சியைத் தூண்டுகின்றன என்பதை நிரூபிக்கிறது.
U87 சினோகிராஃப்ட் மவுஸ் மாதிரியில் BV2-பெறப்பட்ட எக்சோசோம்களின் ஆன்கோஜெனெசிஸ் (AC).BV2 இலிருந்து பெறப்பட்ட RH-பாதிக்கப்பட்ட எக்ஸோசோம்களுடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட BALB/c நிர்வாண எலிகளில் கட்டி அளவு (A) மற்றும் எடை (B) கணிசமாக அதிகரித்தன.BALB/c நிர்வாண எலிகள் (C) மேட்ரிகல் கலவையில் இடைநிறுத்தப்பட்ட 1 x 107 U87 செல்கள் மூலம் தோலடியாக செலுத்தப்பட்டது.உட்செலுத்தப்பட்ட ஆறு நாட்களுக்குப் பிறகு, 100 μg BV2- பெறப்பட்ட எக்சோசோம்கள் எலிகளுக்கு சிகிச்சையளிக்கப்பட்டன.கட்டியின் அளவு மற்றும் எடை ஆகியவை முறையே சுட்டிக்காட்டப்பட்ட நாட்கள் மற்றும் தியாகத்திற்குப் பிறகு அளவிடப்பட்டன. *பி <0.05. *பி <0.05. *ஆர் <0,05. *பி <0.05. *P <0.05. *P <0.05. *ஆர் <0,05. *பி <0.05.
நோய் எதிர்ப்பு சக்தி அல்லது கட்டி வளர்ச்சியுடன் தொடர்புடைய 37 மைஆர்என்ஏக்கள் (16 ஓவர் எக்ஸ்பிரஸ்டு மற்றும் 21 டவுன்எக்ஸ்பிரஸ்டு) டோக்ஸோபிளாஸ்மா ஆர்ஹெச் ஸ்ட்ரெய்ன் (படம் 4 ஏ) தொற்றுக்குப் பிறகு மைக்ரோக்லியாவில் கணிசமாக மாற்றப்பட்டதாக தரவு காட்டுகிறது.மாற்றப்பட்ட மைஆர்என்ஏக்களில் miR-21 இன் ஒப்பீட்டு வெளிப்பாடு நிலைகள் BV2, BV2 மற்றும் U87 செல்களுடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட எக்சோசோம்களில் இருந்து பெறப்பட்ட எக்சோசோம்களில் நிகழ்நேர RT-PCR ஆல் உறுதிப்படுத்தப்பட்டது.மைஆர்-21 இன் வெளிப்பாடு டோக்ஸோபிளாஸ்மா கோண்டி (ஆர்எச் ஸ்ட்ரெய்ன்) (படம். 4 பி) பாதிக்கப்பட்ட BV2 செல்களில் இருந்து எக்ஸோசோம்களில் குறிப்பிடத்தக்க அதிகரிப்பைக் காட்டியது.BV2 மற்றும் U87 கலங்களில் miR-21 இன் ஒப்பீட்டு வெளிப்பாடு நிலைகள் மாற்றப்பட்ட எக்ஸோசோம்கள் (படம் 4B) எடுத்த பிறகு அதிகரித்தன.கட்டி நோயாளிகள் மற்றும் டோக்ஸோபிளாஸ்மா கோண்டி (ME49 ஸ்ட்ரெய்ன்) நோயால் பாதிக்கப்பட்ட எலிகளின் மூளை திசுக்களில் miR-21 வெளிப்பாட்டின் ஒப்பீட்டு அளவுகள் முறையே கட்டுப்பாடுகளை விட அதிகமாக இருந்தன (படம் 4C).இந்த முடிவுகள் விட்ரோ மற்றும் விவோவில் கணிக்கப்பட்ட மற்றும் உறுதிப்படுத்தப்பட்ட மைக்ரோஆர்என்ஏக்களின் வெளிப்பாடு நிலைகளுக்கு இடையிலான வேறுபாடுகளுடன் தொடர்புபடுத்துகின்றன.
டோக்ஸோபிளாஸ்மா கோண்டியால் (RH) பாதிக்கப்பட்ட மைக்ரோக்லியாவில் எக்ஸோசோமல் miP-21a-5p இன் வெளிப்பாட்டின் மாற்றங்கள்.(A) T. gondii RH நோய்த்தொற்றைத் தொடர்ந்து நோய் எதிர்ப்பு சக்தி அல்லது கட்டி வளர்ச்சியுடன் தொடர்புடைய siRNA இல் குறிப்பிடத்தக்க மாற்றங்களைக் காட்டுகிறது.(B) BV2-பெறப்பட்ட எக்சோசோம்கள், BV2-சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட எக்ஸோசோம்கள் மற்றும் U87 கலங்களில் நிகழ்நேர RT-PCR மூலம் தொடர்புடைய miR-21 வெளிப்பாடு நிலைகள் கண்டறியப்பட்டன.(சி) டோக்ஸோபிளாஸ்மா கோண்டி (ME49 ஸ்ட்ரெய்ன்) (N=3) நோயால் பாதிக்கப்பட்ட கட்டி நோயாளிகள் (N=3) மற்றும் எலிகளின் மூளை திசுக்களில் தொடர்புடைய miR-21 வெளிப்பாடு அளவுகள் கண்டறியப்பட்டன. *P <0.05 மாணவர்களின் t சோதனை மூலம் பெறப்பட்டது. *P <0.05 மாணவர்களின் t சோதனை மூலம் பெறப்பட்டது. *P <0,05 было получено с помощью t-критерия Стьюдента. *பி <0.05 மாணவர்களின் டி-டெஸ்ட்டைப் பயன்படுத்தி பெறப்பட்டது. *P <0.05 通过学生t 检验获得。 *பி <0.05 * P <0,05, полученный с помощью t-критерия Стьюдента. * பி <0.05 மாணவர்களின் டி-டெஸ்ட் மூலம் பெறப்பட்டது.
RH-பாதிக்கப்பட்ட BV2 செல்களிலிருந்து எக்சோசோம்கள் விவோ மற்றும் விட்ரோவில் க்ளியோமாஸ் வளர்ச்சிக்கு வழிவகுத்தது (படம் 2, 3).தொடர்புடைய mRNA களைக் கண்டறிய, BV2 அல்லது RH BV2 இலிருந்து பெறப்பட்ட எக்சோசோம்களால் பாதிக்கப்பட்ட U87 கலங்களில் உள்ள ஆன்டிடூமர் இலக்கு மரபணுக்கள், ஃபோர்க்ஹெட் பாக்ஸ் O1 (FoxO1), PTEN மற்றும் புரோகிராம் செய்யப்பட்ட செல் இறப்பு 4 (PDCD4) ஆகியவற்றின் mRNA அளவை ஆய்வு செய்தோம்.FoxO1, PTEN மற்றும் PDCD4 மரபணுக்கள் உட்பட பல கட்டி-தொடர்புடைய மரபணுக்கள் miR-2121,22 பிணைப்பு தளங்களைக் கொண்டிருப்பதாக உயிர் தகவலியல் பகுப்பாய்வு காட்டுகிறது.பிவி2-பெறப்பட்ட எக்சோசோம்களுடன் ஒப்பிடும்போது (படம் 5A) RH-பாதிக்கப்பட்ட BV2-பெறப்பட்ட எக்சோசோம்களில் ஆன்டிடூமர் இலக்கு மரபணுக்களின் mRNA அளவுகள் குறைக்கப்பட்டன.BV2-பெறப்பட்ட எக்ஸோசோம்களுடன் ஒப்பிடும்போது RH- பாதிக்கப்பட்ட BV2-பெறப்பட்ட எக்ஸோசோம்களில் குறைந்த புரத அளவை FoxO1 காட்டியது (படம் 5B).இந்த முடிவுகளின் அடிப்படையில், RH-பாதிக்கப்பட்ட BV2 இலிருந்து பெறப்பட்ட எக்ஸோசோம்கள், ஆன்கோஜெனிக் எதிர்ப்பு மரபணுக்களைக் குறைத்து, கட்டி வளர்ச்சியில் அவற்றின் பங்கைப் பராமரிக்கின்றன என்பதை உறுதிப்படுத்த முடியும்.
டோக்ஸோபிளாஸ்மா RH-பாதிக்கப்பட்ட BV2-பெறப்பட்ட எக்ஸோசோம்கள் U87 க்ளியோமா செல்களில் டோக்ஸோபிளாஸ்மா RH-பாதிக்கப்பட்ட BV2-பெறப்பட்ட எக்ஸோசோம்களால் ஆன்டிடூமர் மரபணுக்களை அடக்குவதற்குத் தூண்டுகிறது.(A) PBS எக்சோசோம்களுடன் ஒப்பிடும்போது T. gondii RH- பாதிக்கப்பட்ட BV2 இலிருந்து பெறப்பட்ட எக்ஸோசோம்களில் FoxO1, PTEN மற்றும் PDCD4 வெளிப்பாடுகளின் நிகழ்நேர PCR.β-ஆக்டின் எம்ஆர்என்ஏ ஒரு கட்டுப்பாட்டாகப் பயன்படுத்தப்பட்டது.(B) FoxO1 வெளிப்பாடு வெஸ்டர்ன் ப்ளாட்டிங் மூலம் தீர்மானிக்கப்பட்டது மற்றும் டென்சிடோமெட்ரி தரவு ImageJ நிரலைப் பயன்படுத்தி புள்ளிவிவர ரீதியாக மதிப்பீடு செய்யப்பட்டது. *P <0.05 மாணவர்களின் t சோதனை மூலம் பெறப்பட்டது. *P <0.05 மாணவர்களின் t சோதனை மூலம் பெறப்பட்டது. *P <0,05 было получено с помощью t-критерия Стьюдента. *பி <0.05 மாணவர்களின் டி-டெஸ்ட்டைப் பயன்படுத்தி பெறப்பட்டது. *P <0.05 通过学生t 检验获得。 *பி <0.05 * P <0,05, полученный с помощью t-критерия Стьюдента. * பி <0.05 மாணவர்களின் டி-டெஸ்ட் மூலம் பெறப்பட்டது.
கட்டியுடன் தொடர்புடைய மரபணு ஒழுங்குமுறையில் எக்ஸோசோம்களில் miP-21 இன் விளைவைப் புரிந்து கொள்ள, U87 செல்கள் லிபோஃபெக்டமைன் 2000 ஐப் பயன்படுத்தி miP-21 இன் தடுப்பானுடன் மாற்றப்பட்டன, மேலும் செல்கள் மாற்றப்பட்ட 24 மணிநேரத்திற்குப் பிறகு அறுவடை செய்யப்பட்டன.miR-21 தடுப்பான்களுடன் மாற்றப்பட்ட செல்களில் உள்ள FoxO1 மற்றும் p27 வெளிப்பாடு நிலைகள் qRT-PCR (படம் 6A,B) ஐப் பயன்படுத்தி BV2-பெறப்பட்ட எக்ஸோசோம்களுடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட கலங்களுடன் ஒப்பிடப்பட்டன.miR-21 இன்ஹிபிட்டரை U87 செல்களுக்கு மாற்றுவது FoxO1 மற்றும் p27 வெளிப்பாட்டைக் கணிசமாகக் குறைத்தது (FIG. 6).
RH-பாதிக்கப்பட்ட எக்ஸோசோமல் BV2-பெறப்பட்ட miP-21 U87 க்ளியோமா செல்களில் FoxO1/p27 வெளிப்பாடு மாற்றப்பட்டது.லிபோஃபெக்டமைன் 2000 ஐப் பயன்படுத்தி U87 செல்கள் miP-21 இன்ஹிபிட்டருடன் மாற்றப்பட்டன மற்றும் இடமாற்றம் செய்யப்பட்ட 24 மணிநேரத்திற்குப் பிறகு செல்கள் அறுவடை செய்யப்பட்டன.miR-21 தடுப்பான்களுடன் மாற்றப்பட்ட செல்களில் உள்ள FoxO1 மற்றும் p27 வெளிப்பாடு நிலைகள், qRT-PCR (A, B) ஐப் பயன்படுத்தி BV2-பெறப்பட்ட எக்சோசோம்களுடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட கலங்களின் நிலைகளுடன் ஒப்பிடப்பட்டது.
ஹோஸ்டின் நோயெதிர்ப்பு மறுமொழியிலிருந்து தப்பிக்க, டோக்ஸோபிளாஸ்மா ஒட்டுண்ணி திசு நீர்க்கட்டியாக மாறுகிறது.அவை புரவலரின் வாழ்நாள் முழுவதும் மூளை, இதயம் மற்றும் எலும்பு தசை உள்ளிட்ட பல்வேறு திசுக்களை ஒட்டுண்ணியாக்கி, ஹோஸ்டின் நோயெதிர்ப்பு சக்தியை மாற்றியமைக்கின்றன.கூடுதலாக, அவை செல் சுழற்சி மற்றும் ஹோஸ்ட் செல்களின் அப்போப்டொசிஸை ஒழுங்குபடுத்தலாம், அவற்றின் பெருக்கத்தை ஊக்குவிக்கின்றன14,24.டோக்ஸோபிளாஸ்மா கோண்டி முக்கியமாக ஹோஸ்ட் டென்ட்ரிடிக் செல்கள், நியூட்ரோபில்கள் மற்றும் மூளை மைக்ரோக்லியா உட்பட மோனோசைட்/மேக்ரோபேஜ் பரம்பரையை பாதிக்கிறது.டோக்ஸோபிளாஸ்மா கோண்டி M2 பினோடைப்பின் மேக்ரோபேஜ்களின் வேறுபாட்டைத் தூண்டுகிறது, நோய்க்கிருமி தொற்றுக்குப் பிறகு காயம் குணப்படுத்துவதை பாதிக்கிறது, மேலும் இது ஹைபர்வாஸ்குலரைசேஷன் மற்றும் கிரானுலோமாட்டஸ் ஃபைப்ரோஸிஸுடன் தொடர்புடையது.டோக்ஸோபிளாஸ்மா நோய்த்தொற்றின் இந்த நடத்தை நோய்க்கிருமி உருவாக்கம் கட்டி வளர்ச்சியுடன் தொடர்புடைய குறிப்பான்களுடன் தொடர்புடையதாக இருக்கலாம்.டோக்ஸோபிளாஸ்மாவால் கட்டுப்படுத்தப்படும் விரோதச் சூழல், தொடர்புடைய முன்கூட்டிய புற்றுநோயை ஒத்திருக்கலாம்.எனவே, டோக்ஸோபிளாஸ்மா தொற்று மூளைக் கட்டிகளின் வளர்ச்சிக்கு பங்களிக்க வேண்டும் என்று கருதலாம்.உண்மையில், பல்வேறு மூளைக் கட்டிகள் உள்ள நோயாளிகளின் சீரத்தில் டோக்ஸோபிளாஸ்மா நோய்த்தொற்றின் அதிக விகிதங்கள் பதிவாகியுள்ளன.கூடுதலாக, டோக்ஸோபிளாஸ்மா கோண்டி மற்றொரு புற்றுநோயை உண்டாக்கும் செயலாக இருக்கலாம் மற்றும் மற்ற தொற்று புற்றுநோய்களுக்கு மூளைக் கட்டிகளை உருவாக்க உதவுவதற்கு ஒருங்கிணைந்த முறையில் செயல்படலாம்.இது சம்பந்தமாக, பி. ஃபால்சிபாரம் மற்றும் எப்ஸ்டீன்-பார் வைரஸ் ஆகியவை புர்கிட்டின் லிம்போமா உருவாவதற்கு சினெர்ஜிஸ்டிக்காக பங்களிக்கின்றன என்பதைக் குறிப்பிடுவது மதிப்பு.
புற்றுநோய் ஆராய்ச்சி துறையில் கட்டுப்பாட்டாளர்களாக எக்ஸோசோம்களின் பங்கு விரிவாக ஆராயப்பட்டது.இருப்பினும், ஒட்டுண்ணிகள் மற்றும் பாதிக்கப்பட்ட புரவலன்களுக்கு இடையே உள்ள எக்ஸோசோம்களின் பங்கு சரியாக புரிந்து கொள்ளப்படவில்லை.இதுவரை, சுரக்கும் புரதங்கள் உட்பட பல்வேறு கட்டுப்பாட்டாளர்கள், புரோட்டோசோவான் ஒட்டுண்ணிகள் புரவலன் தாக்குதலை எதிர்க்கும் மற்றும் தொற்றுநோயை நிலைநிறுத்தும் உயிரியல் செயல்முறைகளை விளக்கியுள்ளனர்.சமீபத்தில், புரோட்டோசோவானுடன் தொடர்புடைய மைக்ரோவெசிகல்களும் அவற்றின் மைக்ரோஆர்என்ஏக்களும் ஹோஸ்ட் செல்களுடன் தொடர்புகொண்டு அவற்றின் உயிர்வாழ்விற்கான சாதகமான சூழலை உருவாக்குகின்றன என்ற கருத்து வளர்ந்து வருகிறது.எனவே, மாற்றப்பட்ட எக்ஸோசோமல் மைஆர்என்ஏக்கள் மற்றும் க்ளியோமா செல் பெருக்கம் ஆகியவற்றுக்கு இடையேயான உறவைக் கண்டறிய மேலதிக ஆய்வுகள் தேவை.மைக்ரோஆர்என்ஏ மாற்றம் (கிளஸ்டர் ஜீன்கள் miR-30c-1, miR-125b-2, miR-23b-27b-24-1 மற்றும் miR-17-92) டோக்ஸோபிளாஸ்மா-பாதிக்கப்பட்ட மனித மேக்ரோபேஜ்களில் உள்ள STAT3 ஊக்குவிப்பாளருடன் பிணைக்கிறது, கட்டுப்படுத்தப்படுகிறது மற்றும் தூண்டுகிறது டோக்ஸோபிளாஸ்மா கோண்டி தொற்றுக்கு பதில் அபோப்டோசிஸ் 29 .டோக்ஸோபிளாஸ்மா நோய்த்தொற்று miR-17-5p மற்றும் miR-106b-5p ஆகியவற்றின் வெளிப்பாட்டை அதிகரிக்கிறது, இது பல ஹைப்பர் ப்ரோலிஃபெரேடிவ் நோய்களுடன் தொடர்புடையது 30 .டோக்ஸோபிளாஸ்மா நோய்த்தொற்றால் கட்டுப்படுத்தப்படும் ஹோஸ்ட் மைஆர்என்ஏக்கள் ஒட்டுண்ணி உயிர்வாழ்வதற்கும் ஹோஸ்ட் உயிரியல் நடத்தையில் நோய்க்கிருமி உருவாக்கத்திற்கும் முக்கியமான மூலக்கூறுகள் என்று இந்தத் தகவல்கள் தெரிவிக்கின்றன.
மாற்றப்பட்ட மைஆர்என்ஏக்கள் க்ளியோமாஸ் உட்பட வீரியம் மிக்க உயிரணுக்களின் துவக்கம் மற்றும் முன்னேற்றத்தின் போது பல்வேறு வகையான நடத்தைகளை பாதிக்கலாம்: வளர்ச்சி சமிக்ஞைகளின் தன்னிறைவு, வளர்ச்சி-தடுக்கும் சமிக்ஞைகளுக்கு உணர்வின்மை, அப்போப்டொசிஸ் ஏய்ப்பு, வரம்பற்ற பிரதி திறன், ஆஞ்சியோஜெனெசிஸ், படையெடுப்பு மற்றும் மெட்டாஸ்டாசிஸ் மற்றும் வீக்கம்.க்ளியோமாவில், மாற்றப்பட்ட மைஆர்என்ஏக்கள் பல வெளிப்பாடு விவரக்குறிப்பு ஆய்வுகளில் அடையாளம் காணப்பட்டுள்ளன.
தற்போதைய ஆய்வில், டோக்ஸோபிளாஸ்மா-பாதிக்கப்பட்ட ஹோஸ்ட் செல்களில் அதிக அளவு மைஆர்என்ஏ-21 வெளிப்பாட்டை உறுதிப்படுத்தினோம்.miR-21 க்ளியோமாஸ், 33 உள்ளிட்ட திடமான கட்டிகளில் அடிக்கடி அதிகமாக அழுத்தப்படும் மைக்ரோஆர்என்ஏக்களில் ஒன்றாக அடையாளம் காணப்பட்டுள்ளது மற்றும் அதன் வெளிப்பாடு க்ளியோமாவின் தரத்துடன் தொடர்புடையது.குவியும் சான்றுகள் miR-21 என்பது க்ளியோமா வளர்ச்சியில் அபோப்டோடிக் எதிர்ப்பு காரணியாக செயல்படும் ஒரு நாவல் புற்றுநோயாகும் மற்றும் மனித மூளையின் வீரியம் மிக்க திசுக்கள் மற்றும் பிளாஸ்மாவில் அதிகமாக அழுத்தப்படுகிறது.சுவாரஸ்யமாக, க்ளியோமா செல்கள் மற்றும் திசுக்களில் miR-21 செயலிழக்கச் செய்வது காஸ்பேஸ்-சார்ந்த அப்போப்டொசிஸ் காரணமாக உயிரணு பெருக்கத்தைத் தடுக்கிறது.miR-21 கணிக்கப்பட்ட இலக்குகளின் உயிர் தகவலியல் பகுப்பாய்வு அப்போப்டொசிஸ் பாதைகளுடன் தொடர்புடைய பல கட்டி அடக்கி மரபணுக்களை வெளிப்படுத்தியது, இதில் திட்டமிடப்பட்ட செல் இறப்பு 4 (PDCD4), tropomyosin (TPM1), PTEN மற்றும் ஃபோர்க்ஹெட் பாக்ஸ் O1 (FoxO1), miR-2121 பிணைப்பு தளம் ஆகியவை அடங்கும்..22.38.
FoxO1, டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் காரணிகளில் ஒன்றாக (FoxO), பல்வேறு வகையான மனித புற்றுநோய்களின் வளர்ச்சியில் ஈடுபட்டுள்ளது மற்றும் p21, p27, Bim மற்றும் FasL40 போன்ற கட்டி அடக்கி மரபணுக்களின் வெளிப்பாட்டைக் கட்டுப்படுத்த முடியும்.FoxO1 ஆனது செல் வளர்ச்சியை அடக்க p27 போன்ற செல் சுழற்சி தடுப்பான்களை பிணைத்து செயல்படுத்துகிறது.மேலும், FoxO1 என்பது PI3K/Akt சிக்னலின் முக்கிய செயல்திறனாகும் மற்றும் p2742 டிரான்ஸ்கிரிப்ஷனை செயல்படுத்துவதன் மூலம் செல் சுழற்சி முன்னேற்றம் மற்றும் செல் வேறுபாடு போன்ற பல உயிரியல் செயல்முறைகளை ஒழுங்குபடுத்துகிறது.
முடிவில், டோக்ஸோபிளாஸ்மா-பாதிக்கப்பட்ட மைக்ரோக்லியாவிலிருந்து பெறப்பட்ட எக்ஸோசோமல் மைஆர்-21, க்ளியோமா செல்களின் வளர்ச்சி சீராக்கியாக முக்கியப் பங்கு வகிக்கக்கூடும் என்று நாங்கள் நம்புகிறோம் (படம் 7).எவ்வாறாயினும், எக்ஸோசோமல் மைஆர்-21, மாற்றப்பட்ட டோக்ஸோபிளாஸ்மா தொற்று மற்றும் க்ளியோமா வளர்ச்சி ஆகியவற்றுக்கு இடையே நேரடி தொடர்பைக் கண்டறிய மேலதிக ஆய்வுகள் தேவை.இந்த முடிவுகள் டோக்ஸோபிளாஸ்மா நோய்த்தொற்றுக்கும் க்ளியோமாவின் நிகழ்வுக்கும் இடையிலான உறவைப் படிப்பதற்கான தொடக்கப் புள்ளியை வழங்கும் என்று எதிர்பார்க்கப்படுகிறது.
க்ளியோமா (மூளை) புற்றுநோயின் பொறிமுறையின் திட்ட வரைபடம் இந்த ஆய்வில் முன்மொழியப்பட்டது.ஆசிரியர் PowerPoint 2019 (Microsoft, Redmond, WA) இல் வரைந்துள்ளார்.
விலங்குகளின் பயன்பாடு உட்பட இந்த ஆய்வில் உள்ள அனைத்து சோதனை நெறிமுறைகளும் சியோல் தேசிய பல்கலைக்கழக விலங்கு பராமரிப்பு மற்றும் பயனர் குழு நிலையான நெறிமுறை வழிகாட்டுதல்களின்படி இருந்தன மற்றும் சியோல் தேசிய பல்கலைக்கழக மருத்துவப் பள்ளியின் நிறுவன மறுஆய்வு வாரியத்தால் அங்கீகரிக்கப்பட்டது (IRB எண் SNU- 150715).-2).அனைத்து சோதனை நடைமுறைகளும் ARRIVE பரிந்துரைகளின்படி மேற்கொள்ளப்பட்டன.
BV2 மவுஸ் மைக்ரோக்லியா மற்றும் U87 மனித க்ளியோமா செல்கள் முறையே துல்பெக்கோவின் மாற்றியமைக்கப்பட்ட கழுகு ஊடகம் (DMEM; வெல்ஜின், சியோல், கொரியா) மற்றும் ரோஸ்வெல் பார்க் மெமோரியல் இன்ஸ்டிடியூட் மீடியம் (RPMI; வெல்ஜீன்) ஆகியவற்றில் வளர்க்கப்பட்டன, ஒவ்வொன்றும் 10% கரு போவின் சீரம், 4 மி.மீ. குளுட்டமைன், 0.2 mM பென்சிலின் மற்றும் 0.05 mM ஸ்ட்ரெப்டோமைசின்.37 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் 5% CO2 உள்ள இன்குபேட்டரில் செல்கள் வளர்க்கப்பட்டன.மற்றொரு க்ளியோமா செல் கோடு, U118, U87 செல்களுடன் ஒப்பிட பயன்படுத்தப்பட்டது.
T. gondii-பாதிக்கப்பட்ட RH மற்றும் ME49 விகாரங்களிலிருந்து எக்ஸோசோம்களை தனிமைப்படுத்த, T. gondii tachyzoites (RH ஸ்ட்ரெய்ன்) 6 வார வயதுடைய BALB/c எலிகளின் வயிற்று குழியிலிருந்து 3-4 நாட்களுக்கு முன் செலுத்தப்பட்டது.Tachyzoites PBS மூலம் மூன்று முறை கழுவப்பட்டு 40% Percoll (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA)43 இல் மையவிலக்கு மூலம் சுத்திகரிக்கப்பட்டது.ஸ்ட்ரெய்ன் ME49 இன் tachyzoites பெற, BALB/c எலிகள் 20 திசு நீர்க்கட்டிகள் மற்றும் நீர்க்கட்டிகள் உள்ள tachyzoite உருமாற்றம் தொற்று பிறகு 6-8 வது நாளில் (PI) வயிற்று குழியை கழுவி மூலம் உட்செலுத்தப்பட்டது.பிபிஎஸ் நோயால் பாதிக்கப்பட்ட எலிகள்.ME49 tachyzoites 100 μg/ml பென்சிலின் (கிப்கோ/BRL, Grand Island, NY, USA), 100 μg/ml ஸ்ட்ரெப்டோமைசின் (கிப்கோ/BRL) மற்றும் 5% கரு போவின் சீரம் (லோன்சா, வால்கெர்ஸ்) ஆகியவற்றுடன் கூடுதலாக வழங்கப்பட்ட செல்களில் வளர்க்கப்பட்டது. .., அமெரிக்கா) 37 °C மற்றும் 5% கார்பன் டை ஆக்சைடு.Vero செல்களில் பயிரிட்ட பிறகு, ME49 tachyzoites இரண்டு முறை 25 கேஜ் ஊசி வழியாகவும், பின்னர் 5 µm வடிகட்டி வழியாகவும் குப்பைகள் மற்றும் செல்களை அகற்றும்.கழுவிய பிறகு, பிபிஎஸ் 44 இல் டச்சிசோயிட்டுகள் மீண்டும் இணைக்கப்பட்டன.பாதிக்கப்பட்ட C57BL/6 எலிகளின் மூளையிலிருந்து (ஓரியண்ட் பயோ அனிமல் சென்டர், சியோங்னம், கொரியா) தனிமைப்படுத்தப்பட்ட நீர்க்கட்டிகளின் உட்செலுத்துதல் மூலம் டோக்ஸோபிளாஸ்மா கோண்டி ஸ்ட்ரெய்ன் ME49 இன் திசு நீர்க்கட்டிகள் பராமரிக்கப்படுகின்றன.ME49-பாதிக்கப்பட்ட எலிகளின் மூளை 3 மாத PI க்குப் பிறகு அறுவடை செய்யப்பட்டு நீர்க்கட்டிகளை தனிமைப்படுத்த நுண்ணோக்கின் கீழ் துண்டு துண்டாக வெட்டப்பட்டது.பாதிக்கப்பட்ட எலிகள் சியோல் நேஷனல் யுனிவர்சிட்டி ஸ்கூல் ஆஃப் மெடிசினில் சிறப்பு நோய்க்கிருமி இல்லாத நிலைமைகளின் (SPF) கீழ் வைக்கப்பட்டன.
உற்பத்தியாளரின் அறிவுறுத்தல்களின்படி miRNeasy Mini Kit (Qiagen, Hilden, Germany) ஐப் பயன்படுத்தி BV2-பெறப்பட்ட எக்ஸோசோம்கள், BV2 செல்கள் மற்றும் திசுக்களில் இருந்து மொத்த ஆர்என்ஏ பிரித்தெடுக்கப்பட்டது, எலுஷன் படிக்கான அடைகாக்கும் நேரம் உட்பட.நானோ டிராப் 2000 ஸ்பெக்ட்ரோஃபோட்டோமீட்டரில் ஆர்என்ஏ செறிவு தீர்மானிக்கப்பட்டது.ஆர்என்ஏ மைக்ரோ அரேய்களின் தரம் அஜிலன்ட் 2100 பயோஅனாலைசர் (அஜிலன்ட் டெக்னாலஜிஸ், ஆம்ஸ்டெல்வீன், நெதர்லாந்து) பயன்படுத்தி மதிப்பிடப்பட்டது.
10% exosome-poor FBS உடன் DMEM ஆனது 100,000g அல்ட்ராசென்ட்ரிஃபிகேஷன் மூலம் 16 மணிநேரத்திற்கு 4°C இல் தயாரிக்கப்பட்டு 0.22 µm வடிகட்டி (Nalgene, Rochester, NY, USA) மூலம் வடிகட்டப்பட்டது.BV2 செல்கள், 5 × 105, DMEM இல் 10% எக்சோசோம்-குறைக்கப்பட்ட FBS மற்றும் 1% நுண்ணுயிர் எதிர்ப்பிகள் 37 ° C மற்றும் 5% CO2 இல் வளர்க்கப்பட்டன.24 மணிநேர அடைகாத்தலுக்குப் பிறகு, ஸ்ட்ரெய்ன் RH அல்லது ME49 (MOI = 10) இன் டாக்கிசோயிட்டுகள் கலங்களில் சேர்க்கப்பட்டன மற்றும் ஊடுருவாத ஒட்டுண்ணிகள் ஒரு மணி நேரத்திற்குள் அகற்றப்பட்டு DMEM உடன் நிரப்பப்பட்டன.BV2 கலங்களிலிருந்து எக்சோசோம்கள் மாற்றியமைக்கப்பட்ட வேறுபட்ட மையவிலக்கு மூலம் தனிமைப்படுத்தப்பட்டன, இது மிகவும் பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படும் முறையாகும்.ஆர்என்ஏ அல்லது புரதப் பகுப்பாய்விற்காக 300 μl பிபிஎஸ்ஸில் எக்ஸோசோம் பெல்லட்டை மீண்டும் இணைக்கவும்.தனிமைப்படுத்தப்பட்ட எக்ஸோசோம்களின் செறிவு BCA புரத மதிப்பீட்டு கிட் (பியர்ஸ், ராக்ஃபோர்ட், IL, USA) மற்றும் நானோ டிராப் 2000 ஸ்பெக்ட்ரோஃபோட்டோமீட்டர் ஆகியவற்றைப் பயன்படுத்தி தீர்மானிக்கப்பட்டது.
BV2 செல்கள் அல்லது BV2 இலிருந்து பெறப்பட்ட எக்சோசோம்கள் PRO-PREP™ புரதப் பிரித்தெடுத்தல் கரைசலில் (iNtRon Biotechnology, Seongnam, Korea) லைஸ் செய்யப்பட்டன, மேலும் புரதங்கள் Coomassie புத்திசாலித்தனமான நீலம் படிந்த 10% SDS பாலிஅக்ரிலாமைடு ஜெல்களில் ஏற்றப்பட்டன.கூடுதலாக, புரதங்கள் 2 மணி நேரம் PVDF சவ்வுகளுக்கு மாற்றப்பட்டன.அலிக்ஸ் ஆன்டிபாடியை (செல் சிக்னலிங் டெக்னாலஜி, பெவர்லி, எம்ஏ, யுஎஸ்ஏ) எக்ஸோசோமல் மார்க்கராகப் பயன்படுத்தி வெஸ்டர்ன் பிளட்கள் சரிபார்க்கப்பட்டன.HRP-இணைந்த ஆடு மவுஸ் எதிர்ப்பு IgG (H + L) (Bethyl Laboratories, Montgomery, TX, USA) மற்றும் LAS-1000 plus luminescent image analysiser (Fuji Photographic Film, Tokyo, Japan) ஆகியவை இரண்டாம் நிலை ஆன்டிபாடியாகப் பயன்படுத்தப்பட்டன..எக்சோசோம்களின் அளவு மற்றும் உருவ அமைப்பை ஆய்வு செய்ய டிரான்ஸ்மிஷன் எலக்ட்ரான் மைக்ரோஸ்கோபி செய்யப்பட்டது.BV2 கலங்களிலிருந்து (6.40 µg/µl) தனிமைப்படுத்தப்பட்ட எக்சோசோம்கள் கார்பன்-பூசப்பட்ட கண்ணிகளில் தயாரிக்கப்பட்டு 1 நிமிடத்திற்கு 2% யுரேனைல் அசிடேட்டுடன் எதிர்மறையாகக் கறைபட்டன.தயாரிக்கப்பட்ட மாதிரிகள் ES1000W Erlangshen CCD கேமரா (Gatan, Pleasanton, CA, USA) பொருத்தப்பட்ட JEOL 1200-EX II (டோக்கியோ, ஜப்பான்) ஐப் பயன்படுத்தி 80 kV வேகமான மின்னழுத்தத்தில் காணப்பட்டன.
BV2-பெறப்பட்ட எக்ஸோசோம்கள் PKH26 ரெட் ஃப்ளோரசன்ட் லிங்கர் கிட் (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) மூலம் அறை வெப்பநிலையில் 15 நிமிடங்களுக்கு கறை படிந்தன.U87 செல்கள், 2×105, PKH26-லேபிளிடப்பட்ட எக்சோசோம்கள் (சிவப்பு) அல்லது எதிர்மறைக் கட்டுப்பாட்டாக எக்சோசோம்கள் இல்லை, 5% CO2 இன்குபேட்டரில் 24 மணி நேரம் 37°C இல் அடைகாக்கப்பட்டது.U87 செல் கருக்கள் DAPI (நீலம்) உடன் படிந்தன, U87 செல்கள் 4% பாராஃபோர்மால்டிஹைடில் 15 நிமிடங்களுக்கு 4 ° C இல் சரி செய்யப்பட்டு, பின்னர் Leica TCS SP8 STED CW கன்ஃபோகல் மைக்ரோஸ்கோப் அமைப்பில் (லைக்கா மைக்ரோசிஸ்டம்ஸ், மேன்ஹெய்ம், ஜெர்மனி) பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டது.கவனிக்கத்தக்கது.
mir-X siRNA முதல் இழை தொகுப்பு மற்றும் SYBR qRT-PCR கிட் (Takara Bio Inc., Shiga, Japan) ஆகியவற்றைப் பயன்படுத்தி siRNA இலிருந்து cDNA ஒருங்கிணைக்கப்பட்டது.SYBR பிரீமிக்ஸுடன் கலந்த ப்ரைமர்கள் மற்றும் டெம்ப்ளேட்களைப் பயன்படுத்தி iQ5 நிகழ்நேர PCR கண்டறிதல் அமைப்பை (பயோ-ராட், ஹெர்குலஸ், CA, USA) பயன்படுத்தி நிகழ்நேர அளவு PCR செய்யப்பட்டது.டிஎன்ஏ 15 வினாடிகளுக்கு 95 டிகிரி செல்சியஸ் மற்றும் 60 வினாடிகளுக்கு 60 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் 40 சுழற்சிகளுக்கு பெருக்கப்பட்டது.ஒவ்வொரு PCR எதிர்வினையிலிருந்தும் தரவு iQ™5 ஆப்டிகல் சிஸ்டம் மென்பொருளின் (பயோ-ராட்) தரவு பகுப்பாய்வு தொகுதியைப் பயன்படுத்தி பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டது.தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட இலக்கு மரபணுக்கள் மற்றும் β-actin/siRNA (மற்றும் U6) ஆகியவற்றுக்கு இடையேயான மரபணு வெளிப்பாட்டின் ஒப்பீட்டு மாற்றங்கள் நிலையான வளைவு முறையைப் பயன்படுத்தி கணக்கிடப்பட்டன.பயன்படுத்தப்படும் ப்ரைமர் வரிசைகள் அட்டவணை 1 இல் காட்டப்பட்டுள்ளன.
3 x 104 U87 க்ளியோமா செல்கள் 96-கிணறு தகடுகளில் விதைக்கப்பட்டு, BV2 (50 μg/mL) இலிருந்து பெறப்பட்ட டோக்ஸோபிளாஸ்மா-பாதிக்கப்பட்ட எக்ஸோசோம்கள் அல்லது BV2 (50 μg/mL) இலிருந்து பெறப்பட்ட நான்பல்ஸ் எக்ஸோசோம்களுடன் 12, 18 மற்றும் 136 மணிநேரங்களில் கட்டுப்பாடுகளாக கலக்கப்பட்டன. .செல் எண்ணிக்கை கிட்-8 (டோஜிண்டோ, குமாமோட்டோ, ஜப்பான்) (துணை புள்ளிவிவரங்கள் S1-S3) 46 ஐப் பயன்படுத்தி செல் பெருக்க விகிதம் தீர்மானிக்கப்பட்டது.
5 வார வயதுடைய பெண் BALB/c நிர்வாண எலிகள் ஓரியண்ட் பயோவிலிருந்து (சியோங்னம்-சி, தென் கொரியா) வாங்கப்பட்டு, அறை வெப்பநிலை (22±2°C) மற்றும் ஈரப்பதம் (45±15°C) ஆகியவற்றில் தனித்தனியாக மலட்டுக் கூண்டுகளில் வைக்கப்பட்டன.%) அறை வெப்பநிலையில் (22±2°C) மற்றும் ஈரப்பதம் (45±15%).SPF (சியோல் நேஷனல் யுனிவர்சிட்டி ஸ்கூல் ஆஃப் மெடிசின் அனிமல் சென்டர்) கீழ் 12 மணி நேர ஒளி சுழற்சி மற்றும் 12 மணி நேர இருண்ட சுழற்சி செய்யப்பட்டது.எலிகள் தோராயமாக 5 எலிகள் கொண்ட மூன்று குழுக்களாகப் பிரிக்கப்பட்டன, மேலும் அனைத்து குழுக்களும் 1 x 107 U87 க்ளியோமா செல்களைக் கொண்ட 400 மில்லி பிபிஎஸ் மூலம் தோலடியாக உட்செலுத்தப்பட்டன மற்றும் வளர்ச்சி காரணி குறைக்கப்பட்டது BD Matrigel™ (BD Science, Miami, FL, USA).கட்டி உட்செலுத்தப்பட்ட ஆறு நாட்களுக்குப் பிறகு, BV2 செல்களில் இருந்து பெறப்பட்ட 200 மில்லிகிராம் எக்ஸோசோம்கள் (டோக்ஸோபிளாஸ்மா தொற்றுடன்/இல்லாதவை) கட்டி தளத்தில் செலுத்தப்பட்டன.கட்டி தொற்று ஏற்பட்ட இருபத்தி இரண்டு நாட்களுக்குப் பிறகு, ஒவ்வொரு குழுவிலும் உள்ள எலிகளின் கட்டியின் அளவு வாரத்திற்கு மூன்று முறை ஒரு காலிபர் மூலம் அளவிடப்படுகிறது, மேலும் கட்டியின் அளவு சூத்திரத்தால் கணக்கிடப்பட்டது: 0.5×(அகலம்)×2×நீளம்.
MiRCURYTM LNA miRNA வரிசையைப் பயன்படுத்தி மைக்ரோஆர்என்ஏ வெளிப்பாடு பகுப்பாய்வு, 7வது தலைமுறை, mmu மற்றும் rno வரிசைகள் (EXIQON, Vedbaek, டென்மார்க்) 3100 மனித, சுட்டி மற்றும் எலி miRNA பிடிப்பு ஆய்வுகளில் 1119 நன்கு வகைப்படுத்தப்பட்ட எலிகளை உள்ளடக்கியது.இந்த செயல்முறையின் போது, ​​250 முதல் 1000 ng வரையான மொத்த RNA 5′-பாஸ்பேட்டிலிருந்து கன்று குடல் அல்கலைன் பாஸ்பேட்டஸுடன் சிகிச்சையளிப்பதன் மூலம் அகற்றப்பட்டது, அதைத் தொடர்ந்து Hy3 பச்சை ஃப்ளோரசன்ட் சாயத்துடன் லேபிளிங் செய்யப்பட்டது.பின்னர் பெயரிடப்பட்ட மாதிரிகள் ஹைப்ரிடைசேஷன் சேம்பர் கிட் (அஜிலன்ட் டெக்னாலஜிஸ், சாண்டா கிளாரா, சிஏ, யுஎஸ்ஏ) மற்றும் ஹைப்ரிடைசேஷன் ஸ்லைடு கிட் (அஜிலன்ட் டெக்னாலஜிஸ்) ஆகியவற்றைப் பயன்படுத்தி மைக்ரோஅரே ஸ்லைடுகளை ஏற்றுவதன் மூலம் கலப்பினப்படுத்தப்பட்டன.56 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் 16 மணிநேரத்திற்கு கலப்பினமாக்கல் மேற்கொள்ளப்பட்டது, பின்னர் உற்பத்தியாளரின் பரிந்துரைகளுக்கு ஏற்ப மைக்ரோஅரேக்கள் கழுவப்பட்டன.செயலாக்கப்பட்ட மைக்ரோஅரே ஸ்லைடுகள் அஜிலன்ட் G2565CA மைக்ரோஅரே ஸ்கேனர் சிஸ்டம் (அஜிலன்ட் டெக்னாலஜிஸ்) பயன்படுத்தி ஸ்கேன் செய்யப்பட்டன.அஜிலன்ட் அம்சம் பிரித்தெடுத்தல் மென்பொருள் பதிப்பு 10.7.3.1 (அஜிலன்ட் டெக்னாலஜிஸ்) ஐப் பயன்படுத்தி ஸ்கேன் செய்யப்பட்ட படங்கள் இறக்குமதி செய்யப்பட்டன, மேலும் மாற்றியமைக்கப்பட்ட Exiqon நெறிமுறையின் தொடர்புடைய GAL கோப்பைப் பயன்படுத்தி ஒவ்வொரு படத்தின் ஒளிரும் தீவிரமும் அளவிடப்பட்டது.தற்போதைய ஆய்வுக்கான மைக்ரோஅரே தரவு ஜியோ தரவுத்தளத்தில் அணுகல் எண் GPL32397 இன் கீழ் டெபாசிட் செய்யப்படுகிறது.
டோக்ஸோபிளாஸ்மாவால் பாதிக்கப்பட்ட RH அல்லது ME49 விகாரங்களின் மைக்ரோக்லியாவில் உள்ள முதிர்ந்த எக்ஸோசோமல் மைஆர்என்ஏக்களின் வெளிப்பாடு சுயவிவரங்கள் பல்வேறு நெட்வொர்க் கருவிகளைப் பயன்படுத்தி பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன.கட்டி வளர்ச்சியுடன் தொடர்புடைய மைஆர்என்ஏக்கள் miRWalk2.0 (http://mirwalk.umm.uni-heidelberg.de) ஐப் பயன்படுத்தி அடையாளம் காணப்பட்டு, 8.0 க்கும் அதிகமான இயல்பான சமிக்ஞை தீவிரத்துடன் (log2) வடிகட்டப்பட்டன.மைஆர்என்ஏக்களில், டி.கோண்டியால் பாதிக்கப்பட்ட RH அல்லது ME49 விகாரங்களால் மாற்றப்பட்ட மைஆர்என்ஏக்களின் வடிகட்டி பகுப்பாய்வு மூலம் 1.5 மடங்குக்கு மேல் மாற்றப்பட்ட மைஆர்என்ஏக்கள் கண்டறியப்பட்டன.
லிபோஃபெக்டமைன் 2000 (இன்விட்ரஜன், கார்ல்ஸ்பாட், சிஏ, அமெரிக்கா) ஐப் பயன்படுத்தி ஆப்டி-எம்இஎம் (கிப்கோ, கார்ல்ஸ்பாட், சிஏ, யுஎஸ்ஏ) இல் ஆறு கிணறு தட்டுகளில் (3 x 105 செல்கள்/கிணறு) செல்கள் விதைக்கப்பட்டன.மாற்றப்பட்ட செல்கள் 6 மணி நேரம் வளர்க்கப்பட்டு, பின்னர் ஊடகம் புதிய முழுமையான ஊடகமாக மாற்றப்பட்டது.இடமாற்றம் செய்யப்பட்ட 24 மணி நேரத்திற்குப் பிறகு செல்கள் அறுவடை செய்யப்பட்டன.
எக்செல் மென்பொருளுடன் (மைக்ரோசாப்ட், வாஷிங்டன், டிசி, அமெரிக்கா) மாணவர்களின் டி-டெஸ்ட்டைப் பயன்படுத்தி புள்ளிவிவர பகுப்பாய்வு முக்கியமாக செய்யப்பட்டது.சோதனை விலங்கு பகுப்பாய்விற்கு, ப்ரிசம் 3.0 மென்பொருளைப் பயன்படுத்தி (கிராப்பேட் மென்பொருள், லா ஜொல்லா, சிஏ, அமெரிக்கா) இருவழி ANOVA செய்யப்பட்டது. பி-மதிப்புகள் <0.05 புள்ளியியல் முக்கியத்துவம் வாய்ந்ததாகக் கருதப்பட்டது. பி-மதிப்புகள் <0.05 புள்ளியியல் முக்கியத்துவம் வாய்ந்ததாகக் கருதப்பட்டது. Значения P <0,05 считались статистически значимыми. P மதிப்புகள் <0.05 புள்ளியியல் முக்கியத்துவம் வாய்ந்ததாகக் கருதப்பட்டது. P 值< 0.05 被认为具有统计学意义。 பி 值< 0.05 Значения P <0,05 считались статистически значимыми. P மதிப்புகள் <0.05 புள்ளியியல் முக்கியத்துவம் வாய்ந்ததாகக் கருதப்பட்டது.
இந்த ஆய்வில் பயன்படுத்தப்படும் அனைத்து சோதனை நெறிமுறைகளும் சியோல் நேஷனல் யுனிவர்சிட்டி ஸ்கூல் ஆஃப் மெடிசின் நிறுவன மறுஆய்வு வாரியத்தால் அங்கீகரிக்கப்பட்டுள்ளன (IRB எண் SNU-150715-2).
The data used in this study are available upon reasonable request from the first author (BK Jung; mulddang@snu.ac.kr). And the microarray data for the current study is deposited in the GEO database under registration number GPL32397.
ஃபர்லே, ஜே. மற்றும் பலர்.2018 இல் மதிப்பிடப்பட்ட உலகளாவிய புற்றுநோய் நிகழ்வுகள் மற்றும் இறப்பு: GLOBOCAN ஆதாரங்கள் மற்றும் முறைகள்.விளக்கம்.ஜே. ரக் 144, 1941–1953 (2019).
ரஷீத், எஸ்., ரெஹ்மான், கே. & ஆகாஷ், எம்.எஸ். ரஷீத், எஸ்., ரெஹ்மான், கே. & ஆகாஷ், எம்.எஸ்.ரஷித், எஸ்., ரெஹ்மான், கே. மற்றும் ஆகாஷ், MS A மூளைக் கட்டிகளுக்கான ஆபத்து காரணிகள் மற்றும் முக்கிய சிகிச்சை தலையீடுகள் பற்றிய ஆய்வு. ரஷீத், எஸ்., ரெஹ்மான், கே. & ஆகாஷ், MS 深入了解脑肿瘤的危险因素及其治疗干预措施。 ரஷீத், எஸ்., ரெஹ்மான், கே. & ஆகாஷ், எம்.எஸ். மூளைக் கட்டி ஆபத்து காரணிகள் மற்றும் சிகிச்சைத் தலையீடுகள் பற்றிய ஆழமான புரிதல்.ரஷித், எஸ்., ரெஹ்மான், கே. மற்றும் ஆகாஷ், MS A மூளைக் கட்டிகளுக்கான ஆபத்து காரணிகள் மற்றும் முக்கிய சிகிச்சை தலையீடுகள் பற்றிய ஆய்வு.உயிர் மருத்துவ அறிவியல்.மருந்தாளுனர்.143, 112119 (2021).
கேட்டோ, ஐ., ஜாங், ஜே. & சன், ஜே. மனித ஓரோடைஜெஸ்டிவ் மற்றும் பெண் பிறப்புறுப்புப் பாதை புற்றுநோய்களில் பாக்டீரியா-வைரஸ் இடைவினைகள்: தொற்றுநோயியல் மற்றும் ஆய்வக ஆதாரங்களின் சுருக்கம். கேட்டோ, ஐ., ஜாங், ஜே. & சன், ஜே. மனித ஓரோடைஜெஸ்டிவ் மற்றும் பெண் பிறப்புறுப்புப் பாதை புற்றுநோய்களில் பாக்டீரியா-வைரஸ் இடைவினைகள்: தொற்றுநோயியல் மற்றும் ஆய்வக ஆதாரங்களின் சுருக்கம்.கேடோ ஐ., ஜாங் ஜே. மற்றும் சன் ஜே. மனித இரைப்பை குடல் மற்றும் பெண் பிறப்புறுப்புப் பாதையின் புற்றுநோயில் பாக்டீரியா-வைரஸ் இடைவினைகள்: தொற்றுநோயியல் மற்றும் ஆய்வகத் தரவுகளின் சுருக்கம். கடோ, ஐ., ஜாங், ஜே. & சன், ஜே. 人类口腔消化道癌和女性生殖道癌中的细菌-病毒相互作用︎ Kato, I., Zhang, J. & Sun, J. மனித வாய்வழி குழி செரிமானம் மற்றும் பெண் இனப்பெருக்க பாதையில் பாக்டீரியா-வைரஸ் தொடர்பு: பிரபலமான நோய் அறிவியல் மற்றும் ஆய்வக ஆதாரங்களின் சுருக்கம்.கேடோ ஐ., ஜாங் ஜே. மற்றும் சன் ஜே. மனித இரைப்பை குடல் புற்றுநோய் மற்றும் பெண் பிறப்புறுப்பு புற்றுநோயில் பாக்டீரியா-வைரஸ் இடைவினைகள்: தொற்றுநோயியல் மற்றும் ஆய்வக தரவுகளின் சுருக்கம்.புற்றுநோய் 14, 425 (2022).
மாகோன், கேஎல் & பாரிஷ், ஜேஎல் தொற்று முதல் புற்றுநோய் வரை: டிஎன்ஏ கட்டி வைரஸ்கள் ஹோஸ்ட் செல் சென்ட்ரல் கார்பன் மற்றும் லிப்பிட் வளர்சிதை மாற்றத்தை எவ்வாறு மாற்றுகின்றன. மாகோன், கேஎல் & பாரிஷ், ஜேஎல் தொற்று முதல் புற்றுநோய் வரை: டிஎன்ஏ கட்டி வைரஸ்கள் ஹோஸ்ட் செல் சென்ட்ரல் கார்பன் மற்றும் லிப்பிட் வளர்சிதை மாற்றத்தை எவ்வாறு மாற்றுகின்றன.மஹோன், கேஎல் மற்றும் பாரிஷ், ஜேஎல் ஃபயர் இன்ஃபெக்ஷன் டு கேன்சர்: டிஎன்ஏ-அடிப்படையிலான கட்டி வைரஸ்கள் ஹோஸ்ட் செல் சென்ட்ரல் கார்பன் மற்றும் லிப்பிட் வளர்சிதை மாற்றத்தை எவ்வாறு மாற்றுகின்றன. மாகோன், KL & பாரிஷ், JL 从感染到癌症：DNA மாகோன், கேஎல் & பாரிஷ், ஜேஎல் தொற்று முதல் புற்றுநோய் வரை: டிஎன்ஏ கட்டி வைரஸ்கள் ஹோஸ்ட் செல் சென்ட்ரல் கார்பன் மற்றும் லிப்பிட் வளர்சிதை மாற்றத்தை எவ்வாறு மாற்றுகின்றன.மஹோன், கேஎல் மற்றும் பாரிஷ், ஜேஎல் ஃபயர்ஸ் இன்ஃபெக்ஷன் டு கேன்சர்: டிஎன்ஏ கட்டி வைரஸ்கள் ஹோஸ்ட் செல்களில் மத்திய கார்பன் மற்றும் லிப்பிட் வளர்சிதை மாற்றத்தை எவ்வாறு மாற்றுகின்றன.திறந்த உயிரியல்.11, 210004 (2021).
கொரியா டா கோஸ்டா, ஜேஎம் மற்றும் பலர்.ஸ்கிஸ்டோசோம்களின் கேடகோல் எஸ்ட்ரோஜன்கள் மற்றும் கல்லீரல் ஃப்ளூக்ஸ் மற்றும் ஹெல்மின்த் தொடர்புடைய புற்றுநோய்.முன்.உள்ளே சூடான.5, 444 (2014).