Nature.com ஐப் பார்வையிட்டதற்கு நன்றி.நீங்கள் பயன்படுத்தும் உலாவி பதிப்பில் CSS ஆதரவு குறைவாக உள்ளது.சிறந்த அனுபவத்திற்கு, புதுப்பிக்கப்பட்ட உலாவியைப் பயன்படுத்துமாறு பரிந்துரைக்கிறோம் (அல்லது Internet Explorer இல் இணக்கத்தன்மை பயன்முறையை முடக்கவும்).இதற்கிடையில், தொடர்ந்து ஆதரவை உறுதிப்படுத்த, தளத்தை ஸ்டைல்கள் மற்றும் ஜாவாஸ்கிரிப்ட் இல்லாமல் வழங்குவோம்.
நுரையீரல் சிஸ்டிக் ஃபைப்ரோஸிஸ் சிகிச்சைக்கான மரபணு திசையன்கள் கடத்தும் காற்றுப்பாதைகளை இலக்காகக் கொள்ள வேண்டும், ஏனெனில் புற நுரையீரல் கடத்தல் எந்த சிகிச்சை விளைவையும் கொண்டிருக்கவில்லை.வைரஸ் கடத்துதலின் செயல்திறன் நேரடியாக கேரியர் வசிக்கும் நேரத்துடன் தொடர்புடையது.இருப்பினும், உள்ளிழுக்கும் போது மரபணு கேரியர்கள் போன்ற விநியோக திரவங்கள் இயற்கையாகவே அல்வியோலியில் பரவுகின்றன, மேலும் எந்த வடிவத்தின் சிகிச்சைத் துகள்களும் மியூகோசிலியரி டிரான்ஸ்போர்ட் மூலம் விரைவாக அகற்றப்படுகின்றன.சுவாசக் குழாயில் மரபணு கேரியர்கள் வசிக்கும் நேரத்தை நீட்டிப்பது முக்கியம் ஆனால் அடைய கடினமாக உள்ளது.சுவாசக் குழாயின் மேற்பரப்பில் செலுத்தப்படும் கேரியர்-இணைந்த காந்தத் துகள்கள் பிராந்திய இலக்கை மேம்படுத்தலாம்.விவோ இமேஜிங்கில் உள்ள சிக்கல்கள் காரணமாக, பயன்படுத்தப்பட்ட காந்தப்புலத்தின் முன்னிலையில் காற்றுப்பாதை மேற்பரப்பில் இதுபோன்ற சிறிய காந்தத் துகள்களின் நடத்தை சரியாக புரிந்து கொள்ளப்படவில்லை.இந்த ஆய்வின் நோக்கம், விவோவில் உள்ள ஒற்றை மற்றும் மொத்தத் துகள்களின் இயக்கவியல் மற்றும் நடத்தை முறைகளைப் படிப்பதற்காக, மயக்கமடைந்த எலிகளின் மூச்சுக்குழாயில் உள்ள காந்தத் துகள்களின் தொடர் இயக்கத்தை விவோவில் காட்சிப்படுத்த சின்க்ரோட்ரான் இமேஜிங்கைப் பயன்படுத்துவதாகும்.ஒரு காந்தப்புலத்தின் முன்னிலையில் லென்டிவைரல் காந்தத் துகள்களை வழங்குவது எலி மூச்சுக்குழாயில் கடத்துதலின் செயல்திறனை அதிகரிக்குமா என்பதையும் நாங்கள் மதிப்பீடு செய்தோம்.Synchrotron X-ray இமேஜிங், விட்ரோ மற்றும் விவோவில் நிலையான மற்றும் நகரும் காந்தப்புலங்களில் காந்தத் துகள்களின் நடத்தையைக் காட்டுகிறது.காந்தங்களைப் பயன்படுத்தி வாழும் காற்றுப்பாதைகளின் மேற்பரப்பில் துகள்களை எளிதில் இழுக்க முடியாது, ஆனால் போக்குவரத்தின் போது, ​​காந்தப்புலம் வலுவாக இருக்கும் பார்வைத் துறையில் வைப்புத்தொகைகள் குவிந்துள்ளன.காந்தப்புலத்தின் முன்னிலையில் லென்டிவைரல் காந்தத் துகள்கள் வழங்கப்பட்டபோது கடத்தும் திறன் ஆறு மடங்கு அதிகரித்தது.ஒன்றாக எடுத்துக்கொண்டால், இந்த முடிவுகள் லென்டிவைரல் காந்தத் துகள்கள் மற்றும் காந்தப்புலங்கள் விவோவில் உள்ள கடத்தும் காற்றுப்பாதைகளில் மரபணு திசையன் இலக்கு மற்றும் கடத்தல் நிலைகளை மேம்படுத்த மதிப்புமிக்க அணுகுமுறைகளாக இருக்கலாம் என்று கூறுகின்றன.
சிஸ்டிக் ஃபைப்ரோஸிஸ் (சிஎஃப்) என்பது சிஎஃப் டிரான்ஸ்மேம்பிரேன் கண்டக்டன்ஸ் ரெகுலேட்டர் (சிஎஃப்டிஆர்) எனப்படும் ஒரு மரபணுவின் மாறுபாடுகளால் ஏற்படுகிறது.சி.எஃப்.டி.ஆர் புரதம் என்பது ஒரு அயன் சேனலாகும், இது உடல் முழுவதும் உள்ள பல எபிடெலியல் செல்களில் உள்ளது, இதில் காற்றுப்பாதைகள் உட்பட, சிஸ்டிக் ஃபைப்ரோஸிஸின் நோய்க்கிருமி உருவாக்கத்தில் ஒரு முக்கிய தளம் உள்ளது.CFTR இல் உள்ள குறைபாடுகள் அசாதாரண நீர் போக்குவரத்து, காற்றுப்பாதை மேற்பரப்பில் நீரிழப்பு மற்றும் காற்றுப்பாதை மேற்பரப்பு திரவ அடுக்கு (ஏஎஸ்எல்) ஆழம் குறைவதற்கு வழிவகுக்கிறது.உள்ளிழுக்கப்படும் துகள்கள் மற்றும் நோய்க்கிருமிகளின் காற்றுப்பாதைகளை அழிக்கும் மியூகோசிலியரி டிரான்ஸ்போர்ட் (MCT) அமைப்பின் திறனையும் இது பாதிக்கிறது.CFTR மரபணுவின் சரியான நகலை வழங்குவதற்கும் ASL, MCT மற்றும் நுரையீரல் ஆரோக்கியத்தை மேம்படுத்துவதற்கும், vivo1 இல் இந்த அளவுருக்களை அளவிடக்கூடிய புதிய தொழில்நுட்பங்களைத் தொடர்ந்து உருவாக்குவதற்கும் லென்டிவைரல் (LV) மரபணு சிகிச்சையை உருவாக்குவதே எங்கள் குறிக்கோள்.
எல்வி திசையன்கள் சிஸ்டிக் ஃபைப்ரோஸிஸ் மரபணு சிகிச்சைக்கான முன்னணி வேட்பாளர்களில் ஒன்றாகும், முக்கியமாக அவை சிகிச்சை மரபணுவை காற்றுப்பாதை அடித்தள செல்களில் (காற்றுப்பாதை ஸ்டெம் செல்கள்) நிரந்தரமாக ஒருங்கிணைக்க முடியும்.இது முக்கியமானது, ஏனெனில் அவை சிஸ்டிக் ஃபைப்ரோஸிஸுடன் தொடர்புடைய செயல்பாட்டு மரபணு-சரிசெய்யப்பட்ட காற்றுப்பாதை மேற்பரப்பு செல்களை வேறுபடுத்துவதன் மூலம் சாதாரண நீரேற்றம் மற்றும் சளி அகற்றலை மீட்டெடுக்க முடியும், இதன் விளைவாக வாழ்நாள் முழுவதும் நன்மைகள் கிடைக்கும்.LV திசையன்கள் கடத்தும் காற்றுப்பாதைகளுக்கு எதிராக இயக்கப்பட வேண்டும், ஏனெனில் இது CF இல் நுரையீரல் ஈடுபாடு தொடங்குகிறது.திசையன் நுரையீரலுக்குள் ஆழமாக அனுப்பப்படுவது அல்வியோலர் கடத்தலுக்கு வழிவகுக்கும், ஆனால் இது சிஸ்டிக் ஃபைப்ரோஸிஸில் எந்த சிகிச்சை விளைவையும் கொண்டிருக்கவில்லை.இருப்பினும், பிரசவத்திற்குப் பிறகு உள்ளிழுக்கும் போது மரபணு கேரியர்கள் போன்ற திரவங்கள் இயற்கையாகவே அல்வியோலிக்குள் இடம்பெயர்கின்றன3,4 மற்றும் சிகிச்சைத் துகள்கள் MCT களால் வாய்வழி குழிக்குள் வேகமாக வெளியேற்றப்படுகின்றன.LV கடத்துதலின் செயல்திறன் நேரடியாக இலக்கு செல்களுக்கு அருகில் இருக்கும் நேரத்தின் நீளத்துடன் தொடர்புடையது, இது செல்லுலார் உறிஞ்சுதலை அனுமதிக்கும் - "குடியிருப்பு நேரம்" 5 இது வழக்கமான பிராந்திய காற்றோட்டம் மற்றும் சளி மற்றும் MCT துகள்களின் ஒருங்கிணைப்பு மூலம் எளிதாகக் குறைக்கப்படுகிறது.சிஸ்டிக் ஃபைப்ரோஸிஸுக்கு, இந்த பகுதியில் அதிக அளவிலான கடத்துதலை அடைவதற்கு காற்றுப்பாதைகளில் எல்வி வசிக்கும் நேரத்தை நீட்டிக்கும் திறன் முக்கியமானது, ஆனால் இதுவரை சவாலாக உள்ளது.
இந்த தடையை கடக்க, எல்வி காந்த துகள்கள் (MPs) இரண்டு நிரப்பு வழிகளில் உதவ முடியும் என்று நாங்கள் முன்மொழிகிறோம்.முதலாவதாக, இலக்கை மேம்படுத்தவும், மரபணு கேரியர் துகள்கள் காற்றுப்பாதையின் சரியான பகுதியில் இருக்கவும் காற்றுப்பாதை மேற்பரப்பில் ஒரு காந்தத்தால் வழிநடத்தப்படலாம்;மற்றும் ASL) செல் அடுக்குக்கு நகர்தல் 6. எம்.பி.க்கள், ஆன்டிபாடிகள், கீமோதெரபி மருந்துகள் அல்லது செல் சவ்வுகளுடன் இணைக்கும் அல்லது அந்தந்த செல் மேற்பரப்பு ஏற்பிகளுடன் இணைக்கும் மற்றும் கட்டி தளங்களில் குவிக்கும் பிற சிறிய மூலக்கூறுகளுடன் பிணைக்கப்படும் போது, ​​அவை இலக்கு மருந்து விநியோக வாகனங்களாக பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படுகின்றன. நிலையான மின்சாரம் இருப்பது.புற்றுநோய் சிகிச்சைக்கான காந்தப்புலங்கள் 7. மற்ற "ஹைபர்தெர்மிக்" முறைகள் ஊசலாடும் காந்தப்புலங்களுக்கு வெளிப்படும் போது MP களை சூடாக்குவதன் மூலம் கட்டி செல்களை கொல்வதை நோக்கமாகக் கொண்டுள்ளன.காந்தப் பரிமாற்றத்தின் கொள்கை, இதில் டிஎன்ஏவை உயிரணுக்களுக்கு மாற்றுவதை மேம்படுத்துவதற்கு ஒரு காந்தப்புலம் ஒரு இடமாற்ற முகவராகப் பயன்படுத்தப்படுகிறது, இது பொதுவாக விட்ரோவில் வைரஸ் அல்லாத மற்றும் வைரஸ் மரபணு திசையன்களின் வரம்பைப் பயன்படுத்தி கடின-கடத்தக்கூடிய செல் கோடுகளுக்குப் பயன்படுத்தப்படுகிறது. ..ஒரு நிலையான காந்தப்புலத்தின் முன்னிலையில் மனித மூச்சுக்குழாய் எபிட்டிலியத்தின் செல் கோட்டிற்கு எல்வி எம்பி இன் விட்ரோவை வழங்குவதன் மூலம் எல்வி காந்தமாற்றத்தின் செயல்திறன் நிறுவப்பட்டது, இது எல்வி வெக்டருடன் மட்டும் ஒப்பிடும்போது கடத்துதலின் செயல்திறனை 186 மடங்கு அதிகரிக்கிறது.சிஸ்டிக் ஃபைப்ரோஸிஸின் இன் விட்ரோ மாடலுக்கும் எல்வி எம்டி பயன்படுத்தப்பட்டது, அங்கு காந்த பரிமாற்றமானது சிஸ்டிக் ஃபைப்ரோஸிஸ் ஸ்பூட்டம்10 முன்னிலையில் காற்று-திரவ இடைமுக கலாச்சாரங்களில் எல்வி கடத்துதலை 20 மடங்கு அதிகரித்தது.இருப்பினும், விவோ உறுப்பு காந்தமாற்றம் ஒப்பீட்டளவில் சிறிய கவனத்தைப் பெற்றுள்ளது மற்றும் ஒரு சில விலங்கு ஆய்வுகளில் மட்டுமே மதிப்பீடு செய்யப்பட்டுள்ளது11,12,13,14,15, குறிப்பாக நுரையீரலில்16,17.இருப்பினும், சிஸ்டிக் ஃபைப்ரோஸிஸில் நுரையீரல் சிகிச்சையில் காந்த இடமாற்றத்தின் சாத்தியக்கூறுகள் தெளிவாக உள்ளன.டான் மற்றும் பலர்.(2020) "காந்த நானோ துகள்களின் பயனுள்ள நுரையீரல் விநியோகம் பற்றிய சரிபார்ப்பு ஆய்வு, சிஸ்டிக் ஃபைப்ரோஸிஸ் நோயாளிகளுக்கு மருத்துவ விளைவுகளை மேம்படுத்த எதிர்கால CFTR உள்ளிழுக்கும் உத்திகளுக்கு வழி வகுக்கும்" என்று கூறினார்.
பயன்படுத்தப்பட்ட காந்தப்புலத்தின் முன்னிலையில் சுவாசக் குழாயின் மேற்பரப்பில் சிறிய காந்தத் துகள்களின் நடத்தை காட்சிப்படுத்துவது மற்றும் ஆய்வு செய்வது கடினம், எனவே அவை சரியாக புரிந்து கொள்ளப்படவில்லை.மற்ற ஆய்வுகளில், ASL18 ஆழம் மற்றும் MCT19 நடத்தை, 20 ஆகியவற்றில் வாயுக் கால்வாய் மேற்பரப்பு நீரேற்றத்தை நேரடியாக அளக்க, ஆக்கிரமிப்பு அல்லாத இமேஜிங் மற்றும் நிமிடத்தை அளவிடுவதற்கான Synchrotron Propagation Based Phase Contrast X-Ray Imaging (PB-PCXI) முறையை உருவாக்கியுள்ளோம். மற்றும் சிகிச்சையின் செயல்திறனின் ஆரம்ப அறிகுறியாகப் பயன்படுத்தப்படுகிறது.கூடுதலாக, எங்கள் MCT ஸ்கோரிங் முறையானது, PB-PCXI21 உடன் தெரியும் MCT குறிப்பான்களாக அலுமினா அல்லது உயர் ஒளிவிலகல் குறியீட்டு கண்ணாடியால் ஆன 10-35 µm விட்டம் கொண்ட துகள்களைப் பயன்படுத்துகிறது.இரண்டு முறைகளும் எம்.பி.க்கள் உட்பட பல்வேறு துகள் வகைகளை படம்பிடிக்க ஏற்றது.
அதிக இடஞ்சார்ந்த மற்றும் தற்காலிகத் தீர்மானம் காரணமாக, எங்களின் PB-PCXI-அடிப்படையிலான ASL மற்றும் MCT மதிப்பீடுகள், விவோவில் உள்ள ஒற்றை மற்றும் மொத்தத் துகள்களின் இயக்கவியல் மற்றும் நடத்தை முறைகளைப் படிக்க மிகவும் பொருத்தமானது, இது MP மரபணு விநியோக முறைகளைப் புரிந்துகொள்ளவும் மேம்படுத்தவும் உதவுகிறது.இங்கே நாங்கள் பயன்படுத்தும் அணுகுமுறை SPring-8 BL20B2 பீம்லைனைப் பயன்படுத்தி எங்கள் ஆய்வுகளின் அடிப்படையில் அமைந்துள்ளது, இதில் எலிகளின் நாசி மற்றும் நுரையீரல் காற்றுப்பாதைகளில் ஒரு போலி வெக்டரின் டோஸ் செலுத்தப்பட்டதைத் தொடர்ந்து திரவ இயக்கத்தைக் காட்சிப்படுத்தினோம். எங்கள் மரபணுவில்.3.4 கேரியர் டோஸ் கொண்ட விலங்கு ஆய்வுகள்.
இந்த ஆய்வின் நோக்கம் பிபி-பிசிஎக்ஸ்ஐ சின்க்ரோட்ரானைப் பயன்படுத்தி, நேரடி எலிகளின் மூச்சுக்குழாயில் உள்ள எம்.பி.க்களின் தொடர் அசைவுகளைக் காட்சிப்படுத்துவதாகும்.இந்த PB-PCXI இமேஜிங் ஆய்வுகள் MP தொடர், காந்தப்புல வலிமை மற்றும் MP இயக்கத்தில் அவற்றின் விளைவைத் தீர்மானிக்க இடம் ஆகியவற்றை சோதிக்க வடிவமைக்கப்பட்டுள்ளது.ஒரு வெளிப்புற காந்தப்புலம் டெலிவரி செய்யப்பட்ட MF தங்குவதற்கு அல்லது இலக்கு பகுதிக்கு செல்ல உதவும் என்று நாங்கள் கருதினோம்.இந்த ஆய்வுகள் படிவுக்குப் பிறகு மூச்சுக்குழாயில் எஞ்சியிருக்கும் துகள்களின் அளவை அதிகரிக்கும் காந்த அமைப்புகளைத் தீர்மானிக்க எங்களுக்கு அனுமதித்தது.இரண்டாவது தொடர் ஆய்வுகளில், எல்வி-எம்பிகளை எலி ஏர்வேஸ்களுக்கு விவோ டெலிவரி செய்வதன் மூலம் ஏற்படும் டிரான்ஸ்டக்ஷன் பேட்டர்னை நிரூபிக்க இந்த உகந்த உள்ளமைவைப் பயன்படுத்துவதை நோக்கமாகக் கொண்டுள்ளோம். அதிகரித்த எல்வி கடத்தல் திறன்..
அனைத்து விலங்கு ஆய்வுகளும் அடிலெய்டு பல்கலைக்கழகம் (M-2019-060 மற்றும் M-2020-022) மற்றும் SPring-8 Synchrotron விலங்கு நெறிமுறைக் குழுவால் அங்கீகரிக்கப்பட்ட நெறிமுறைகளின்படி நடத்தப்பட்டன.ARRIVE இன் பரிந்துரைகளின்படி சோதனைகள் மேற்கொள்ளப்பட்டன.
அனைத்து எக்ஸ்ரே படங்களும் ஜப்பானில் உள்ள SPring-8 சின்க்ரோட்ரானில் உள்ள BL20XU பீம்லைனில் முன்பு 21,22 விவரித்ததைப் போன்ற அமைப்பைப் பயன்படுத்தி எடுக்கப்பட்டது.சுருக்கமாக, சின்க்ரோட்ரான் சேமிப்பு வளையத்திலிருந்து 245 மீ தொலைவில் சோதனைப் பெட்டி அமைந்திருந்தது.துகள் இமேஜிங் ஆய்வுகளுக்கு 0.6 மீ மற்றும் விவோ இமேஜிங் ஆய்வுகளுக்கு 0.3 மீ என்ற மாதிரியிலிருந்து கண்டறியும் தூரம் கட்ட மாறுபாடு விளைவுகளை உருவாக்க பயன்படுத்தப்படுகிறது.25 keV ஆற்றல் கொண்ட ஒரு ஒற்றை நிற கற்றை பயன்படுத்தப்பட்டது.படங்கள் உயர் தெளிவுத்திறன் கொண்ட எக்ஸ்ரே டிரான்ஸ்யூசரைப் பயன்படுத்தி (SPring-8 BM3) sCMOS டிடெக்டருடன் இணைக்கப்பட்டன.டிரான்ஸ்யூசர் 10 µm தடிமனான சிண்டிலேட்டரை (Gd3Al2Ga3O12) பயன்படுத்தி X-கதிர்களை புலப்படும் ஒளியாக மாற்றுகிறது, பின்னர் அது ×10 (NA 0.3) நுண்ணோக்கி நோக்கத்தைப் பயன்படுத்தி sCMOS சென்சாருக்கு அனுப்பப்படுகிறது.sCMOS டிடெக்டர் ஓர்கா-ஃப்ளாஷ்4.0 (ஹமாமட்சு ஃபோட்டானிக்ஸ், ஜப்பான்) வரிசை அளவு 2048 × 2048 பிக்சல்கள் மற்றும் மூல பிக்சல் அளவு 6.5 × 6.5 µm.இந்த அமைப்பு 0.51 µm இன் பயனுள்ள ஐசோட்ரோபிக் பிக்சல் அளவையும் தோராயமாக 1.1 மிமீ × 1.1 மிமீ பார்வை புலத்தையும் வழங்குகிறது.100 எம்எஸ் வெளிப்பாடு கால அளவு சுவாசத்தால் ஏற்படும் இயக்க கலைப்பொருட்களைக் குறைக்கும் அதே வேளையில் காற்றுப்பாதைகளுக்கு உள்ளேயும் வெளியேயும் காந்தத் துகள்களின் சமிக்ஞை-இரைச்சல் விகிதத்தை அதிகரிக்க தேர்வு செய்யப்பட்டது.விவோ ஆய்வுகளில், எக்ஸ்ரே பாதையில் ஒரு வேகமான எக்ஸ்ரே ஷட்டர் வைக்கப்பட்டு, கதிர்வீச்சின் அளவைக் கட்டுப்படுத்த, எக்ஸ்-ரே கற்றை வெளிப்பாடுகளுக்கு இடையில் தடுக்கப்பட்டது.
எந்த SPring-8 PB-PCXI இமேஜிங் ஆய்வுகளிலும் LV மீடியா பயன்படுத்தப்படவில்லை, ஏனெனில் BL20XU இமேஜிங் சேம்பர் உயிரியல் பாதுகாப்பு நிலை 2 சான்றளிக்கப்படவில்லை.அதற்கு பதிலாக, அளவுகள், பொருட்கள், இரும்புச் செறிவுகள் மற்றும் பயன்பாடுகள் ஆகியவற்றை உள்ளடக்கிய இரண்டு வணிக விற்பனையாளர்களிடமிருந்து நன்கு வகைப்படுத்தப்பட்ட எம்.பி.க்களை நாங்கள் தேர்ந்தெடுத்தோம் - முதலில் காந்தப்புலங்கள் கண்ணாடி நுண்குழாய்களில் எம்.பி.க்களின் இயக்கத்தை எவ்வாறு பாதிக்கின்றன என்பதைப் புரிந்துகொள்வதற்காக, பின்னர் வாழும் காற்றுப்பாதைகள்.மேற்பரப்பு.MP இன் அளவு 0.25 முதல் 18 µm வரை மாறுபடும் மற்றும் பல்வேறு பொருட்களால் ஆனது (அட்டவணை 1 ஐப் பார்க்கவும்), ஆனால் MP இல் உள்ள காந்தத் துகள்களின் அளவு உட்பட ஒவ்வொரு மாதிரியின் கலவையும் தெரியவில்லை.எங்களின் விரிவான MCT ஆய்வுகள் 19, 20, 21, 23, 24 ஆகியவற்றின் அடிப்படையில், 5 µm வரை உள்ள MPகளை மூச்சுக்குழாய் காற்றுப்பாதை மேற்பரப்பில் காணலாம் என்று எதிர்பார்க்கிறோம், எடுத்துக்காட்டாக, MP இயக்கத்தின் மேம்பட்ட தெரிவுநிலையைக் காண தொடர்ச்சியான பிரேம்களைக் கழிப்பதன் மூலம்.0.25 µm இன் ஒற்றை MP ஆனது, இமேஜிங் சாதனத்தின் தெளிவுத்திறனை விட சிறியது, ஆனால் PB-PCXI அவற்றின் அளவு மாறுபாடு மற்றும் டெபாசிட் செய்யப்பட்ட பிறகு அவை டெபாசிட் செய்யப்படும் மேற்பரப்பு திரவத்தின் இயக்கத்தைக் கண்டறியும் என்று எதிர்பார்க்கப்படுகிறது.
அட்டவணையில் உள்ள ஒவ்வொரு MPக்கான மாதிரிகள்.1 0.63 மிமீ உள் விட்டம் கொண்ட 20 μl கண்ணாடி நுண்குழாய்களில் (டிரம்மண்ட் மைக்ரோகேப்ஸ், பிஏ, அமெரிக்கா) தயாரிக்கப்பட்டது.கார்பஸ்குலர் துகள்கள் தண்ணீரில் கிடைக்கின்றன, அதே சமயம் CombiMag துகள்கள் உற்பத்தியாளரின் தனியுரிம திரவத்தில் கிடைக்கின்றன.ஒவ்வொரு குழாயிலும் பாதி திரவம் (தோராயமாக 11 μl) நிரப்பப்பட்டு மாதிரி வைத்திருப்பவரின் மீது வைக்கப்படுகிறது (படம் 1 ஐப் பார்க்கவும்).கண்ணாடி நுண்குழாய்கள் முறையே இமேஜிங் அறையில் மேடையில் கிடைமட்டமாக வைக்கப்பட்டு, திரவத்தின் விளிம்புகளில் நிலைநிறுத்தப்பட்டன.அரிய பூமி, நியோடைமியம், இரும்பு மற்றும் போரான் (NdFeB) (N35, cat. No. LM1652, Jaycar Electronics, Australia) ஆகியவற்றால் செய்யப்பட்ட 19 மிமீ விட்டம் (28 மிமீ நீளம்) நிக்கல்-ஷெல் காந்தம் 1.17 T மீள்தன்மையுடன் இணைக்கப்பட்டது. ரெண்டரிங் செய்யும் போது உங்கள் நிலையை தொலைநிலையில் மாற்றுவதற்கு தனி பரிமாற்ற அட்டவணை.காந்தம் மாதிரிக்கு மேலே சுமார் 30 மிமீ இருக்கும் போது எக்ஸ்ரே இமேஜிங் தொடங்குகிறது மற்றும் படங்கள் ஒரு வினாடிக்கு 4 பிரேம்களில் பெறப்படும்.இமேஜிங்கின் போது, ​​காந்தம் கண்ணாடி நுண்குழாய் குழாய்க்கு (சுமார் 1 மிமீ தொலைவில்) அருகில் கொண்டு வரப்பட்டது, பின்னர் புலத்தின் வலிமை மற்றும் நிலையின் விளைவை மதிப்பிடுவதற்காக குழாய் வழியாக நகர்த்தப்பட்டது.
xy மாதிரியின் மொழிபெயர்ப்பின் கட்டத்தில் கண்ணாடி நுண்குழாய்களில் MP மாதிரிகளைக் கொண்ட ஒரு இன் விட்ரோ இமேஜிங் அமைப்பு.எக்ஸ்ரே கற்றையின் பாதை சிவப்பு புள்ளியிடப்பட்ட கோடுடன் குறிக்கப்பட்டுள்ளது.
எம்.பி.க்களின் இன் விட்ரோ தெரிவுநிலை நிறுவப்பட்டதும், அவற்றின் துணைக்குழு காட்டு வகை பெண் விஸ்டார் அல்பினோ எலிகளில் (~12 வார வயது, ~200 கிராம்) விவோவில் சோதிக்கப்பட்டது.Medetomidine 0.24 mg/kg (Domitor®, Zenoaq, ஜப்பான்), மிடாசோலம் 3.2 mg/kg (Dormicum®, Astellas Pharma, ஜப்பான்) மற்றும் பூட்டோர்பனால் 4 mg/kg (Vetorphale®, Meiji Seika).எலிகளுக்கு இன்ட்ராபெரிட்டோனியல் ஊசி மூலம் பார்மா (ஜப்பான்) கலவையுடன் மயக்க மருந்து கொடுக்கப்பட்டது.மயக்க மருந்துக்குப் பிறகு, மூச்சுக்குழாயைச் சுற்றியுள்ள ரோமங்களை அகற்றி, எண்டோட்ராஷியல் குழாயைச் (ET; 16 Ga இன்ட்ராவெனஸ் கேனுலா, டெருமோ பி.சி.டி) செருகி, வெப்பப் பையைக் கொண்ட தனிப்பயனாக்கப்பட்ட இமேஜிங் தட்டில் அவற்றை அசையாமல் இமேஜிங்கிற்குத் தயார் செய்தனர். உடல் வெப்பநிலையை பராமரிக்க.22. படம் 2a இல் காட்டப்பட்டுள்ளபடி எக்ஸ்ரே படத்தில் மூச்சுக்குழாயை கிடைமட்டமாக சீரமைக்க, இமேஜிங் தகடு பின்னர் இமேஜிங் பெட்டியில் உள்ள மாதிரி நிலையுடன் சிறிது கோணத்தில் இணைக்கப்பட்டது.
(அ) ​​SPring-8 இமேஜிங் யூனிட்டில் vivo இமேஜிங் அமைப்பில், X-ray பீம் பாதை சிவப்பு புள்ளியிடப்பட்ட கோடுடன் குறிக்கப்பட்டது.(b, c) இரண்டு ஆர்த்தோகனலாக பொருத்தப்பட்ட IP கேமராக்களைப் பயன்படுத்தி டிரச்சியல் மேக்னட் உள்ளூர்மயமாக்கல் தொலைவிலிருந்து செய்யப்பட்டது.திரையில் படத்தின் இடது பக்கத்தில், தலையை வைத்திருக்கும் வயர் லூப் மற்றும் ET குழாயின் உள்ளே டெலிவரி கேனுலா நிறுவப்பட்டிருப்பதைக் காணலாம்.
100 µl கண்ணாடி சிரிஞ்சைப் பயன்படுத்தி ரிமோட் கண்ட்ரோல் செய்யப்பட்ட சிரிஞ்ச் பம்ப் சிஸ்டம் (UMP2, World Precision Instruments, Sarasota, FL) 30 Ga ஊசியைப் பயன்படுத்தி PE10 குழாய்களுடன் (0.61 mm OD, 0.28 mm ID) இணைக்கப்பட்டது.எண்டோட்ராஷியல் குழாயைச் செருகும்போது மூச்சுக்குழாயில் முனை சரியான நிலையில் இருப்பதை உறுதிசெய்ய குழாயைக் குறிக்கவும்.மைக்ரோபம்பைப் பயன்படுத்தி, சிரிஞ்ச் உலக்கை அகற்றப்பட்டு, குழாயின் முனையானது வழங்கப்பட வேண்டிய MP மாதிரியில் மூழ்கியது.ஏற்றப்பட்ட விநியோக குழாய் பின்னர் எண்டோட்ராஷியல் குழாயில் செருகப்பட்டு, முனையை நாம் எதிர்பார்க்கும் பயன்பாட்டு காந்தப்புலத்தின் வலுவான பகுதியில் வைத்தது.எங்கள் Arduino-அடிப்படையிலான நேரப் பெட்டியுடன் இணைக்கப்பட்ட ஒரு மூச்சுக் கண்டறியும் கருவியைப் பயன்படுத்தி படத்தைப் பெறுதல் கட்டுப்படுத்தப்பட்டது, மேலும் அனைத்து சிக்னல்களும் (எ.கா., வெப்பநிலை, சுவாசம், ஷட்டர் திறந்த/மூடு மற்றும் படத்தைப் பெறுதல்) Powerlab மற்றும் LabChart (AD இன்ஸ்ட்ரூமென்ட்ஸ், சிட்னி, ஆஸ்திரேலியா) ஆகியவற்றைப் பயன்படுத்தி பதிவு செய்யப்பட்டன. 22 இமேஜிங் போது, ​​வீடுகள் கிடைக்காத போது, ​​இரண்டு IP கேமராக்கள் (Panasonic BB-SC382) ஒன்றுக்கொன்று தோராயமாக 90° இல் நிலைநிறுத்தப்பட்டு, இமேஜிங்கின் போது மூச்சுக்குழாயுடன் தொடர்புடைய காந்தத்தின் நிலையைக் கட்டுப்படுத்தப் பயன்படுத்தப்பட்டன (படம் 2b, c).இயக்க கலைப்பொருட்களைக் குறைக்க, முனைய சுவாச ஓட்டம் பீடபூமியின் போது ஒரு மூச்சுக்கு ஒரு படம் பெறப்பட்டது.
காந்தம் இரண்டாவது கட்டத்துடன் இணைக்கப்பட்டுள்ளது, இது இமேஜிங் உடலின் வெளிப்புறத்தில் தொலைவில் அமைந்திருக்கலாம்.காந்தத்தின் பல்வேறு நிலைகள் மற்றும் கட்டமைப்புகள் சோதிக்கப்பட்டன, இதில் அடங்கும்: மூச்சுக்குழாய்க்கு மேலே தோராயமாக 30° கோணத்தில் வைக்கப்பட்டுள்ளது (உள்ளமைவுகள் புள்ளிவிவரங்கள் 2a மற்றும் 3a இல் காட்டப்பட்டுள்ளன);ஒரு காந்தம் விலங்குக்கு மேலேயும் மற்றொன்று கீழேயும், ஈர்ப்புக்காக அமைக்கப்பட்ட துருவங்களுடன் (படம் 3b)., விலங்குக்கு மேலே ஒரு காந்தம் மற்றும் கீழே ஒன்று, விரட்டுவதற்காக அமைக்கப்பட்ட துருவங்கள் (படம் 3c), மற்றும் ஒரு காந்தம் மேலே மற்றும் மூச்சுக்குழாய்க்கு செங்குத்தாக (படம் 3d).விலங்கு மற்றும் காந்தத்தை அமைத்து, சிரிஞ்ச் பம்பில் சோதனையின் கீழ் MP ஐ ஏற்றிய பிறகு, படங்களைப் பெற்றவுடன் 4 µl/sec என்ற விகிதத்தில் 50 µl அளவை வழங்கவும்.பின்னர் காந்தமானது, படங்களைப் பெறுவதைத் தொடரும்போது மூச்சுக்குழாயில் அல்லது குறுக்கே முன்னும் பின்னுமாக நகர்த்தப்படுகிறது.
விவோ இமேஜிங்கிற்கான காந்த கட்டமைப்பு (அ) மூச்சுக்குழாய்க்கு மேலே தோராயமாக 30° கோணத்தில் ஒரு காந்தம், (ஆ) ஈர்ப்பிற்காக கட்டமைக்கப்பட்ட இரண்டு காந்தங்கள், (இ) விரட்டுவதற்காக கட்டமைக்கப்பட்ட இரண்டு காந்தங்கள், (ஈ) மேலே ஒரு காந்தம் மற்றும் செங்குத்தாக மூச்சுக்குழாய்.பார்வையாளர் மூச்சுக்குழாய் வழியாக வாயிலிருந்து நுரையீரல் வரை பார்த்தார், எக்ஸ்ரே கற்றை எலியின் இடது பக்கம் வழியாகச் சென்று வலது பக்கத்திலிருந்து வெளியேறியது.காந்தமானது சுவாசப்பாதையின் நீளத்தில் நகர்த்தப்படுகிறது அல்லது எக்ஸ்ரே கற்றையின் திசையில் மூச்சுக்குழாயின் மேல் இடது மற்றும் வலதுபுறமாக நகர்த்தப்படுகிறது.
சுவாசம் மற்றும் இதயத் துடிப்பு ஆகியவற்றின் கலவை இல்லாத நிலையில், காற்றுப்பாதைகளில் உள்ள துகள்களின் தெரிவுநிலை மற்றும் நடத்தை ஆகியவற்றைக் கண்டறியவும் நாங்கள் முயன்றோம்.எனவே, இமேஜிங் காலத்தின் முடிவில், பெண்டோபார்பிட்டல் அதிகப்படியான அளவு (Somnopentyl, Pitman-Moore, Washington Crossing, USA; ~65 mg/kg ip) காரணமாக விலங்குகள் மனிதாபிமானத்துடன் கருணைக்கொலை செய்யப்பட்டன.சில விலங்குகள் இமேஜிங் மேடையில் விடப்பட்டன, மேலும் சுவாசம் மற்றும் இதயத் துடிப்பு நிறுத்தப்பட்ட பிறகு, இமேஜிங் செயல்முறை மீண்டும் மீண்டும் செய்யப்பட்டது, காற்றுப்பாதை மேற்பரப்பில் MP எதுவும் தெரியவில்லை என்றால், MP இன் கூடுதல் டோஸ் சேர்க்கப்பட்டது.
இதன் விளைவாக உருவான படங்கள் பிளாட் மற்றும் டார்க் ஃபீல்டுக்கு சரி செய்யப்பட்டு, பின்னர் MATLAB (R2020a, The Mathworks) இல் எழுதப்பட்ட தனிப்பயன் ஸ்கிரிப்டைப் பயன்படுத்தி ஒரு திரைப்படமாக (வினாடிக்கு 20 பிரேம்கள்; சுவாச வீதத்தைப் பொறுத்து 15–25 × சாதாரண வேகம்) ஒருங்கிணைக்கப்பட்டன.
எல்வி மரபணு திசையன் விநியோகம் குறித்த அனைத்து ஆய்வுகளும் அடிலெய்ட் பல்கலைக்கழக ஆய்வக விலங்கு ஆராய்ச்சி மையத்தில் நடத்தப்பட்டது மற்றும் காந்தப்புலத்தின் முன்னிலையில் எல்வி-எம்பி விநியோகம் விவோவில் மரபணு பரிமாற்றத்தை மேம்படுத்த முடியுமா என்பதை மதிப்பிடுவதற்கு SPring-8 பரிசோதனையின் முடிவுகளைப் பயன்படுத்துவதை நோக்கமாகக் கொண்டது. .MF மற்றும் காந்தப்புலத்தின் விளைவுகளை மதிப்பிடுவதற்கு, விலங்குகளின் இரண்டு குழுக்களுக்கு சிகிச்சை அளிக்கப்பட்டது: ஒரு குழுவிற்கு LV MF உடன் காந்த வேலை வாய்ப்புடன் செலுத்தப்பட்டது, மற்ற குழுவிற்கு LV MF உடன் காந்தம் இல்லாமல் ஒரு கட்டுப்பாட்டு குழுவுடன் செலுத்தப்பட்டது.
எல்வி மரபணு திசையன்கள் முன்பு விவரிக்கப்பட்ட முறைகள் 25, 26 ஐப் பயன்படுத்தி உருவாக்கப்பட்டுள்ளன.LacZ வெக்டார், MPSV கான்ஸ்டிட்யூட்டிவ் புரமோட்டர் (LV-LacZ) மூலம் இயக்கப்படும் அணுக்கரு உள்ளூர்மயமாக்கப்பட்ட பீட்டா-கேலக்டோசிடேஸ் மரபணுவை வெளிப்படுத்துகிறது, இது நுரையீரல் திசுக்களின் முன்பக்கங்களிலும் பகுதிகளிலும் தெரியும், கடத்தப்பட்ட செல்களில் நீல எதிர்வினை தயாரிப்பை உருவாக்குகிறது.TU/ml இல் டைட்டரைக் கணக்கிட ஹெமோசைட்டோமீட்டரைப் பயன்படுத்தி LacZ- நேர்மறை செல்களின் எண்ணிக்கையை கைமுறையாக எண்ணுவதன் மூலம் செல் கலாச்சாரங்களில் டைட்ரேஷன் செய்யப்பட்டது.கேரியர்கள் -80 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் பாதுகாக்கப்பட்டு, பயன்பாட்டிற்கு முன் கரைக்கப்பட்டு, 1:1 என்ற விகிதத்தில் கலந்து, பிரசவத்திற்கு முன் குறைந்தது 30 நிமிடங்களுக்கு பனியில் அடைகாப்பதன் மூலம் CombiMag உடன் பிணைக்கப்படும்.
சாதாரண ஸ்ப்ராக் டாவ்லி எலிகள் (n = 3/குழு, ~2-3 மயக்க மருந்து ip 0.4mg/kg medetomidine (Domitor, Ilium, Australia) மற்றும் 60mg/kg கெட்டமைன் (Ilium, ஆஸ்திரேலியா) 1 மாத வயதில்) ip ) ஊசி மற்றும் அறுவைசிகிச்சை அல்லாத வாய்வழி கன்னுலேஷன் 16 கே இன்ட்ராவெனஸ் கேனுலா.மூச்சுக்குழாய் காற்றுப்பாதை திசு எல்வி கடத்துதலைப் பெறுவதை உறுதிசெய்ய, இது முன்னர் விவரிக்கப்பட்ட இயந்திரக் குழப்ப நெறிமுறையைப் பயன்படுத்தி நிபந்தனைக்குட்படுத்தப்பட்டது, இதில் மூச்சுக்குழாய் காற்றுப்பாதை மேற்பரப்பு ஒரு கம்பி கூடையால் அச்சில் தேய்க்கப்பட்டது (N-Circle, NTSE-022115 முனை இல்லாமல் நைட்டினோல் ஸ்டோன் எக்ஸ்ட்ராக்டர்) -UDH, குக் மெடிக்கல், அமெரிக்கா) 30 ப28.பின்னர், உயிரியல் பாதுகாப்பு அமைச்சரவையில் குழப்பம் ஏற்பட்ட சுமார் 10 நிமிடங்களுக்குப் பிறகு, எல்வி-எம்பியின் மூச்சுக்குழாய் நிர்வாகம் செய்யப்பட்டது.
இந்தச் சோதனையில் பயன்படுத்தப்பட்ட காந்தப்புலம், இன் விவோ எக்ஸ்ரே ஆய்வைப் போலவே கட்டமைக்கப்பட்டது, அதே காந்தங்கள் மூச்சுக்குழாயின் மீது வடிகட்டுதல் ஸ்டென்ட் கிளாம்ப்களுடன் வைக்கப்பட்டுள்ளன (படம் 4).50 µl அளவு (2 x 25 µl அலிகோட்ஸ்) LV-MP முன்பு விவரிக்கப்பட்டபடி ஜெல்-டிப் பைப்டைப் பயன்படுத்தி மூச்சுக்குழாயில் (n = 3 விலங்குகள்) வழங்கப்பட்டது.கட்டுப்பாட்டு குழு (n = 3 விலங்குகள்) காந்தத்தைப் பயன்படுத்தாமல் அதே LV-MP ஐப் பெற்றது.உட்செலுத்துதல் முடிந்த பிறகு, எண்டோட்ராஷியல் குழாயிலிருந்து கானுலா அகற்றப்பட்டு விலங்கு வெளியேற்றப்படுகிறது.காந்தம் அகற்றப்படுவதற்கு முன் 10 நிமிடங்கள் இருக்கும்.எலிகளுக்கு மெலோக்சிகாம் (1 மிலி/கிலோ) (இலியம், ஆஸ்திரேலியா) உடன் தோலடியாக டோஸ் செய்யப்பட்டது, அதைத் தொடர்ந்து 1 மி.கி/கி.கி அடிபமாசோல் ஹைட்ரோகுளோரைடு (ஆன்டிசெடன், ஜோடிஸ், ஆஸ்திரேலியா) இன்ட்ராபெரிட்டோனியல் ஊசி மூலம் மயக்க மருந்து திரும்பப் பெறப்பட்டது.எலிகள் சூடாக வைக்கப்பட்டு மயக்க மருந்திலிருந்து முழுமையாக மீட்கப்படும் வரை கண்காணிக்கப்பட்டது.
உயிரியல் பாதுகாப்பு அமைச்சரவையில் எல்வி-எம்பி விநியோக சாதனம்.ET குழாயின் வெளிர் சாம்பல் நிற லூயர்-லாக் ஸ்லீவ் வாயிலிருந்து நீண்டு செல்வதையும், படத்தில் காட்டப்பட்டுள்ள ஜெல் பைப்பெட் முனையானது ET குழாய் வழியாக மூச்சுக்குழாயில் விரும்பிய ஆழத்திற்குச் செருகப்படுவதையும் நீங்கள் காணலாம்.
எல்வி-எம்பி நிர்வாக செயல்முறைக்கு ஒரு வாரத்திற்குப் பிறகு, 100% CO2 ஐ உள்ளிழுப்பதன் மூலம் விலங்குகள் மனிதாபிமானத்துடன் பலியிடப்பட்டன மற்றும் எங்கள் நிலையான X-gal சிகிச்சையைப் பயன்படுத்தி LacZ வெளிப்பாடு மதிப்பிடப்பட்டது.எண்டோட்ராஷியல் ட்யூப் பிளேஸ்மென்ட் காரணமாக எந்த இயந்திர சேதமும் அல்லது திரவம் தக்கவைப்பும் பகுப்பாய்வில் சேர்க்கப்படாது என்பதை உறுதி செய்வதற்காக மூன்று காடால் குருத்தெலும்பு வளையங்கள் அகற்றப்பட்டன.பகுப்பாய்விற்காக ஒவ்வொரு மூச்சுக்குழாயும் நீளமாக வெட்டப்பட்டு இரண்டு பகுதிகளாக வெட்டப்பட்டு சிலிகான் ரப்பர் (சில்கார்ட், டவ் இன்க்) கொண்ட ஒரு கோப்பையில் மினுடியன் ஊசியை (ஃபைன் சயின்ஸ் டூல்ஸ்) பயன்படுத்தி லுமினல் மேற்பரப்பைக் காட்சிப்படுத்தியது.DigiLite கேமரா மற்றும் TCapture மென்பொருளுடன் (Tucsen Photonics, China) Nikon நுண்ணோக்கியை (SMZ1500) பயன்படுத்தி முன்பக்க புகைப்படம் எடுத்தல் மூலம் கடத்தப்பட்ட கலங்களின் விநியோகம் மற்றும் தன்மை உறுதிப்படுத்தப்பட்டது.படங்கள் 20x உருப்பெருக்கத்தில் (மூச்சுக்குழாயின் முழு அகலத்திற்கான அதிகபட்ச அமைப்பு உட்பட) பெறப்பட்டன, மூச்சுக்குழாயின் முழு நீளமும் படிப்படியாகக் காட்டப்படும், படங்களை "தைக்க" அனுமதிக்கும் வகையில் ஒவ்வொரு படத்திற்கும் இடையில் போதுமான ஒன்றுடன் ஒன்று உள்ளது.பிளானர் மோஷன் அல்காரிதத்தைப் பயன்படுத்தி, ஒவ்வொரு மூச்சுக்குழாயில் இருந்தும் படங்கள் ஒருங்கிணைந்த பட எடிட்டர் பதிப்பு 2.0.3 (மைக்ரோசாப்ட் ரிசர்ச்) ஐப் பயன்படுத்தி ஒரு கூட்டுப் படமாக இணைக்கப்பட்டன. 0.35 < சாயல் < 0.58, செறிவு > 0.15 மற்றும் மதிப்பு < 0.7 ஆகிய அமைப்புகளைப் பயன்படுத்தி, ஒவ்வொரு விலங்கிலிருந்தும் மூச்சுக்குழாய் கலப்புப் படங்களுக்குள் உள்ள LacZ வெளிப்பாட்டின் பரப்பளவு, முன்பு விவரிக்கப்பட்டபடி தானியங்கி MATLAB ஸ்கிரிப்டை (R2020a, MathWorks) பயன்படுத்தி அளவிடப்பட்டது. 0.35 < சாயல் < 0.58, செறிவு > 0.15 மற்றும் மதிப்பு < 0.7 ஆகிய அமைப்புகளைப் பயன்படுத்தி, ஒவ்வொரு விலங்கிலிருந்தும் மூச்சுக்குழாய் கலப்புப் படங்களுக்குள் LacZ வெளிப்பாட்டின் பரப்பளவு முன்பு விவரிக்கப்பட்டபடி தானியங்கு MATLAB ஸ்கிரிப்ட் (R2020a, MathWorks) ஐப் பயன்படுத்தி அளவிடப்பட்டது. Площадь экспрессии LacZ в составных изображениях трахеи от каждого животного была количественно определена с использованием автоматизированного сценария MATLAB (R2020a, MathWorks), как описано ранее28, с использованием настроек 0,35 <оттенок <0,58, насыщенность> 0,15 и значение <0 ,7. ஒவ்வொரு விலங்கிலிருந்தும் கலப்பு மூச்சுக்குழாய் படங்களில் LacZ வெளிப்பாட்டின் பரப்பளவு 0.35 அமைப்புகளைப் பயன்படுத்தி முன்பு விவரிக்கப்பட்டபடி தானியங்கு MATLAB ஸ்கிரிப்டை (R2020a, MathWorks) பயன்படுத்தி அளவிடப்பட்டது.0.15 மற்றும் மதிப்பு<0 .7.如 前所 述 ， ， 自动 mat 自动 （（（， 只 动物 的 复合 的 的 的 的 进行 量化 ， 使用 0.35 <色调 <0.58 、 饱和度> 0.15 和值 <0.7 和值 的 设置。。。。。。。。。。。。。如 前所 述 ， ， 自动 matlab 脚本 （（R2020a ， Mathworks） 来自 每 只 的 复合 的 的 表达 量化 量化 ， 使用 使用 0.35 <色调 <0.58 、> 0.15 和值 <0.7 的.                    Области экспрессии LacZ на составных изображениях трахеи каждого животного количественно определяли с использованием автоматизированного сценария MATLAB (R2020a, MathWorks), как описано ранее, с использованием настроек 0,35 <оттенок <0,58, насыщенность> 0,15 и значение <0,7 . 0.35 < சாயல் < 0.58, செறிவு > 0.15 மற்றும் மதிப்பு < 0.7 ஆகியவற்றின் அமைப்புகளைப் பயன்படுத்தி முன்னர் விவரிக்கப்பட்டபடி, ஒவ்வொரு விலங்கின் மூச்சுக்குழாயின் கூட்டுப் படங்களிலும் LacZ வெளிப்பாட்டின் பகுதிகள் தானியங்கி MATLAB ஸ்கிரிப்டை (R2020a, MathWorks) பயன்படுத்தி அளவிடப்பட்டன.GIMP v2.10.24 இல் திசு வரையறைகளை கண்காணிப்பதன் மூலம், திசு பகுதியை அடையாளம் காணவும் மற்றும் மூச்சுக்குழாய் திசுக்களுக்கு வெளியே தவறான கண்டறிதல்களைத் தடுக்கவும் ஒவ்வொரு கலப்பு படத்திற்கும் ஒரு முகமூடி கைமுறையாக உருவாக்கப்பட்டது.ஒவ்வொரு விலங்கிலிருந்தும் அனைத்து கலப்புப் படங்களிலிருந்தும் கறை படிந்த பகுதிகள் அந்த விலங்கின் மொத்த கறை படிந்த பகுதியைக் கொடுக்க சுருக்கப்பட்டது.வர்ணம் பூசப்பட்ட பகுதி, முகமூடியின் மொத்தப் பரப்பால் பிரிக்கப்பட்டு, இயல்பாக்கப்பட்ட பகுதியைப் பெறுகிறது.
ஒவ்வொரு மூச்சுக்குழலும் பாரஃபினில் உட்பொதிக்கப்பட்டு 5 µm தடிமனாக பிரிக்கப்பட்டது.பிரிவுகள் 5 நிமிடங்களுக்கு நடுநிலை வேகமான சிவப்பு நிறத்தில் மாற்றியமைக்கப்பட்டன மற்றும் Nikon Eclipse E400 நுண்ணோக்கி, DS-Fi3 கேமரா மற்றும் NIS உறுப்பு பிடிப்பு மென்பொருள் (பதிப்பு 5.20.00) ஆகியவற்றைப் பயன்படுத்தி படங்கள் பெறப்பட்டன.
அனைத்து புள்ளிவிவர பகுப்பாய்வுகளும் GraphPad Prism v9 (GraphPad Software, Inc.) இல் செய்யப்பட்டன.புள்ளியியல் முக்கியத்துவம் p ≤ 0.05 இல் அமைக்கப்பட்டது.ஷாபிரோ-வில்க் சோதனையைப் பயன்படுத்தி இயல்புநிலை சோதிக்கப்பட்டது மற்றும் இணைக்கப்படாத டி-டெஸ்ட்டைப் பயன்படுத்தி LacZ கறைகளில் உள்ள வேறுபாடுகள் மதிப்பிடப்பட்டன.
அட்டவணை 1 இல் விவரிக்கப்பட்டுள்ள ஆறு MPக்கள் PCXI ஆல் ஆய்வு செய்யப்பட்டன, மேலும் தெரிவுநிலை அட்டவணை 2 இல் விவரிக்கப்பட்டுள்ளது. இரண்டு பாலிஸ்டிரீன் MPகள் (MP1 மற்றும் MP2; 18 µm மற்றும் 0.25 µm, முறையே) PCXI ஆல் காணப்படவில்லை, ஆனால் மீதமுள்ள மாதிரிகள் அடையாளம் காணப்பட்டன. (உதாரணங்கள் படம் 5 இல் காட்டப்பட்டுள்ளன).MP3 மற்றும் MP4 ஆகியவை பலவீனமாகத் தெரியும் (10-15% Fe3O4; 0.25 µm மற்றும் 0.9 µm, முறையே).MP5 (98% Fe3O4; 0.25 µm) சோதனை செய்யப்பட்ட சில சிறிய துகள்களைக் கொண்டிருந்தாலும், அது மிகவும் உச்சரிக்கப்பட்டது.CombiMag MP6 தயாரிப்பை வேறுபடுத்துவது கடினம்.எல்லா சந்தர்ப்பங்களிலும், தந்துகிக்கு இணையாக காந்தத்தை முன்னும் பின்னுமாக நகர்த்துவதன் மூலம் எம்எஃப்களைக் கண்டறியும் நமது திறன் பெரிதும் மேம்படுத்தப்பட்டது.காந்தங்கள் தந்துகியிலிருந்து விலகிச் செல்லும்போது, ​​துகள்கள் நீண்ட சங்கிலிகளில் இழுக்கப்பட்டன, ஆனால் காந்தங்கள் நெருங்கி காந்தப்புல வலிமை அதிகரித்ததால், துகள்கள் தந்துகியின் மேற்பரப்பை நோக்கி நகர்ந்ததால் துகள் சங்கிலிகள் சுருக்கப்பட்டன (துணை வீடியோ S1 ஐப் பார்க்கவும். : MP4), மேற்பரப்பில் துகள் அடர்த்தியை அதிகரிக்கிறது.மாறாக, தந்துகியில் இருந்து காந்தம் அகற்றப்படும் போது, ​​புலத்தின் வலிமை குறைகிறது மற்றும் MPக்கள் தந்துகியின் மேல் மேற்பரப்பில் இருந்து நீண்ட சங்கிலிகளாக மறுசீரமைக்கப்படுகின்றன (துணை வீடியோ S2: MP4 ஐப் பார்க்கவும்).காந்தம் நகர்வதை நிறுத்திய பிறகு, துகள்கள் சமநிலை நிலையை அடைந்த பிறகு சிறிது நேரம் தொடர்ந்து நகரும்.MP ஆனது தந்துகியின் மேல் மேற்பரப்பை நோக்கி நகரும் போது, ​​காந்த துகள்கள் திரவத்தின் மூலம் குப்பைகளை இழுக்க முனைகின்றன.
PCXI இன் கீழ் MP இன் தெரிவுநிலை மாதிரிகளுக்கு இடையே கணிசமாக மாறுபடும்.(a) MP3, (b) MP4, (c) MP5 மற்றும் (d) MP6.இங்கு காட்டப்பட்டுள்ள அனைத்து படங்களும் தந்துகிக்கு மேலே சுமார் 10 மிமீ காந்தத்துடன் எடுக்கப்பட்டது.வெளிப்படையான பெரிய வட்டங்கள் தந்துகிகளில் சிக்கிய காற்று குமிழ்கள், இது கட்ட மாறுபாடு படத்தின் கருப்பு மற்றும் வெள்ளை விளிம்பு அம்சங்களை தெளிவாகக் காட்டுகிறது.சிவப்பு பெட்டி மாறுபாட்டை மேம்படுத்தும் உருப்பெருக்கத்தைக் குறிக்கிறது.அனைத்து புள்ளிவிவரங்களிலும் உள்ள காந்த சுற்றுகளின் விட்டம் அளவிடப்பட வேண்டியதில்லை மற்றும் காட்டப்பட்டுள்ளதை விட தோராயமாக 100 மடங்கு பெரியதாக இருக்கும்.
காந்தம் தந்துகியின் மேல் இடது மற்றும் வலதுபுறமாக நகரும் போது, ​​MP சரத்தின் கோணம் காந்தத்துடன் சீரமைக்க மாறுகிறது (படம் 6 ஐப் பார்க்கவும்), இதனால் காந்தப்புலக் கோடுகளை வரையறுக்கிறது.MP3-5க்கு, நாண் வாசல் கோணத்தை அடைந்த பிறகு, துகள்கள் தந்துகியின் மேல் மேற்பரப்பில் இழுத்துச் செல்கின்றன.இது பெரும்பாலும் காந்தப்புலம் வலுவாக இருக்கும் இடத்திற்கு அருகில் பெரிய குழுக்களாக எம்.பி.க்கள் திரள்வதற்கு காரணமாகிறது (துணை வீடியோ S3: MP5 ஐப் பார்க்கவும்).இது குறிப்பாகத் தந்துகியின் முடிவிற்கு அருகில் படமெடுக்கும் போது தெளிவாகத் தெரிகிறது, இது MPஐ ஒருங்கிணைத்து திரவ-காற்று இடைமுகத்தில் கவனம் செலுத்துகிறது.MP6 இல் உள்ள துகள்கள், MP3-5 இல் உள்ளதை விட வேறுபடுத்துவது கடினம், காந்தம் தந்துகி வழியாக நகரும்போது இழுக்கப்படவில்லை, ஆனால் MP சரங்கள் பிரிந்து, துகள்களை பார்வைக்கு விட்டுவிட்டன (துணை வீடியோ S4: MP6 ஐப் பார்க்கவும்).சில சமயங்களில், இமேஜிங் தளத்தில் இருந்து காந்தத்தை நீண்ட தூரம் நகர்த்துவதன் மூலம் பயன்படுத்தப்பட்ட காந்தப்புலம் குறைக்கப்பட்டால், மீதமுள்ள எம்.பி.க்கள் குழாயின் கீழ் மேற்பரப்பில் புவியீர்ப்பு விசையால் மெதுவாக இறங்கி, சரத்தில் எஞ்சியிருக்கும் (துணை வீடியோ S5: MP3 ஐப் பார்க்கவும்) .
காந்தம் தந்துகி மேல் வலதுபுறமாக நகரும் போது MP சரத்தின் கோணம் மாறுகிறது.(a) MP3, (b) MP4, (c) MP5 மற்றும் (d) MP6.சிவப்பு பெட்டி மாறுபாட்டை மேம்படுத்தும் உருப்பெருக்கத்தைக் குறிக்கிறது.இந்த நிலையான படங்களில் காட்சிப்படுத்த முடியாத முக்கியமான துகள் அமைப்பு மற்றும் மாறும் தகவலை வெளிப்படுத்துவதால், கூடுதல் வீடியோக்கள் தகவல் நோக்கங்களுக்காக உள்ளன என்பதை நினைவில் கொள்ளவும்.
மூச்சுக்குழாய் வழியாக காந்தத்தை மெதுவாக முன்னும் பின்னுமாக நகர்த்துவது விவோவில் சிக்கலான இயக்கத்தின் பின்னணியில் MF இன் காட்சிப்படுத்தலை எளிதாக்குகிறது என்பதை எங்கள் சோதனைகள் காட்டுகின்றன.பாலிஸ்டிரீன் மணிகள் (எம்பி1 மற்றும் எம்பி2) தந்துகியில் காணப்படாததால் விவோ சோதனைகள் எதுவும் செய்யப்படவில்லை.மீதமுள்ள நான்கு MFகள் ஒவ்வொன்றும் விவோவில் காந்தத்தின் நீண்ட அச்சில் மூச்சுக்குழாயின் மேல் சுமார் 30° கோணத்தில் செங்குத்தாக நிலைநிறுத்தப்பட்டது (புள்ளிவிவரங்கள் 2b மற்றும் 3a ஐப் பார்க்கவும்), இது நீண்ட MF சங்கிலிகளை உருவாக்கி மிகவும் பயனுள்ளதாக இருந்தது. ஒரு காந்தத்தை விட..கட்டமைப்பு நிறுத்தப்பட்டது.MP3, MP4 மற்றும் MP6 ஆகியவை உயிருள்ள விலங்குகளின் மூச்சுக்குழாயில் காணப்படவில்லை.விலங்குகளை மனிதாபிமானமாகக் கொன்ற பிறகு எலிகளின் சுவாசக் குழாயைக் காட்சிப்படுத்தும்போது, ​​சிரிஞ்ச் பம்பைப் பயன்படுத்தி கூடுதல் அளவு சேர்க்கப்பட்டாலும் துகள்கள் கண்ணுக்குத் தெரியாமல் இருந்தன.MP5 ஆனது மிக உயர்ந்த இரும்பு ஆக்சைடு உள்ளடக்கத்தைக் கொண்டிருந்தது மற்றும் காணக்கூடிய ஒரே துகள் ஆகும், எனவே இது விவோவில் MP நடத்தையை மதிப்பிடவும் வகைப்படுத்தவும் பயன்படுத்தப்பட்டது.
MF செருகும் போது மூச்சுக்குழாய் மீது காந்தத்தை வைப்பதன் விளைவாக பல, ஆனால் எல்லாவற்றிலும் MFகள் பார்வைத் துறையில் குவிந்துள்ளன.துகள்களின் மூச்சுக்குழாய் நுழைவு மனிதாபிமான முறையில் கருணைக்கொலை செய்யப்பட்ட விலங்குகளில் சிறப்பாகக் காணப்படுகிறது.படம் 7 மற்றும் துணை வீடியோ S6: MP5, சுவாசக் குழாயின் மேற்பரப்பில் உள்ள துகள்களின் விரைவான காந்தப் பிடிப்பு மற்றும் சீரமைப்பைக் காட்டுகிறது, இது MP க்கள் சுவாசக் குழாயின் விரும்பிய பகுதிகளுக்கு இலக்காக முடியும் என்பதைக் குறிக்கிறது.MF பிரசவத்திற்குப் பிறகு மூச்சுக்குழாயில் தொலைதூரத்தில் தேடும் போது, ​​சில MFகள் கரினாவுக்கு அருகில் காணப்பட்டன, இது அனைத்து MF களையும் சேகரித்து வைத்திருக்க போதுமான காந்தப்புல வலிமையைக் குறிக்கிறது, ஏனெனில் அவை திரவ நிர்வாகத்தின் போது அதிகபட்ச காந்தப்புல வலிமையின் பகுதி வழியாக வழங்கப்படுகின்றன.செயல்முறை.இருப்பினும், பிரசவத்திற்குப் பிந்தைய எம்.பி செறிவுகள் படப் பகுதியைச் சுற்றி அதிகமாக இருந்தன, பல எம்.பி.க்கள் காற்றுப்பாதைப் பகுதிகளில் பயன்படுத்தப்பட்ட காந்தப்புல வலிமை அதிகமாக இருந்ததாகக் கூறுகிறது.
சமீபத்தில் கருணைக்கொலை செய்யப்பட்ட எலியின் மூச்சுக்குழாயில் MP5 அனுப்பப்படுவதற்கு முன் (a) மற்றும் (b) படங்கள், இமேஜிங் பகுதிக்கு சற்று மேலே காந்தம் வைக்கப்பட்டுள்ளது.சித்தரிக்கப்பட்ட பகுதி இரண்டு குருத்தெலும்பு வளையங்களுக்கு இடையில் அமைந்துள்ளது.எம்பி பிரசவத்திற்கு முன் சுவாசக் குழாயில் சிறிது திரவம் உள்ளது.சிவப்பு பெட்டி மாறுபாட்டை மேம்படுத்தும் உருப்பெருக்கத்தைக் குறிக்கிறது.இந்தப் படங்கள் S6: MP5 துணை வீடியோவில் இடம்பெற்றுள்ள வீடியோவிலிருந்து எடுக்கப்பட்டவை.
விவோவில் மூச்சுக்குழாய் வழியாக காந்தத்தை நகர்த்துவதால், காற்றுப்பாதை மேற்பரப்பில் MP சங்கிலியின் கோணத்தில் மாற்றம் ஏற்பட்டது, இது தந்துகிகளில் காணப்பட்டது போன்றது (படம் 8 மற்றும் துணை வீடியோ S7: MP5 ஐப் பார்க்கவும்).எவ்வாறாயினும், எங்கள் ஆய்வில், தந்துகிகளால் செய்யக்கூடியது போல, எம்.பி.க்களை வாழும் சுவாசக் குழாய்களின் மேற்பரப்பில் இழுக்க முடியாது.சில சந்தர்ப்பங்களில், காந்தம் இடது மற்றும் வலதுபுறமாக நகரும் போது MP சங்கிலி நீளமாகிறது.சுவாரஸ்யமாக, மூச்சுக்குழாய் வழியாக காந்தத்தை நீளமாக நகர்த்தும்போது துகள் சங்கிலி திரவத்தின் மேற்பரப்பு அடுக்கின் ஆழத்தை மாற்றுகிறது, மேலும் காந்தத்தை நேரடியாக மேல்நோக்கி நகர்த்தும்போது மற்றும் துகள் சங்கிலி செங்குத்து நிலைக்குச் செல்லும்போது விரிவடைகிறது (பார்க்க துணை வீடியோ S7).: MP5 0:09, கீழ் வலது).காந்தமானது மூச்சுக்குழாயின் மேற்புறத்தில் பக்கவாட்டாக நகர்த்தப்பட்டபோது (அதாவது, விலங்கின் இடது அல்லது வலதுபுறம், மூச்சுக்குழாயின் நீளத்தை விட) பண்பு இயக்க முறை மாறியது.துகள்கள் அவற்றின் இயக்கத்தின் போது இன்னும் தெளிவாகத் தெரியும், ஆனால் மூச்சுக்குழாயில் இருந்து காந்தம் அகற்றப்பட்டபோது, ​​துகள் சரங்களின் முனைகள் தெரியும் (துணை வீடியோ S8: MP5, 0:08 இல் தொடங்கி).இது கண்ணாடி நுண்குழாயில் பயன்படுத்தப்பட்ட காந்தப்புலத்தின் செயல்பாட்டின் கீழ் காந்தப்புலத்தின் கவனிக்கப்பட்ட நடத்தைக்கு உடன்படுகிறது.
நேரடி மயக்கமடைந்த எலியின் மூச்சுக்குழாயில் MP5 ஐக் காட்டும் மாதிரி படங்கள்.(அ) ​​மூச்சுக்குழாயின் மேல் மற்றும் இடதுபுறத்தில் உள்ள படங்களைப் பெற காந்தம் பயன்படுத்தப்படுகிறது, பின்னர் (ஆ) காந்தத்தை வலது பக்கம் நகர்த்திய பிறகு.சிவப்பு பெட்டி மாறுபாட்டை மேம்படுத்தும் உருப்பெருக்கத்தைக் குறிக்கிறது.இந்த படங்கள் S7 இன் துணை வீடியோ: MP5 இல் இடம்பெற்ற வீடியோவில் இருந்து எடுக்கப்பட்டவை.
இரண்டு துருவங்களும் மூச்சுக்குழாய்க்கு மேலேயும் கீழேயும் வடக்கு-தெற்கு நோக்குநிலையில் டியூன் செய்யப்பட்டபோது (அதாவது, ஈர்க்கும்; படம். 3b), MP நாண்கள் நீளமாகத் தோன்றி மூச்சுக்குழாயின் பக்கவாட்டுச் சுவரில் அமைந்திருந்தன. மூச்சுக்குழாய் (பின் இணைப்பு பார்க்கவும்).வீடியோ S9:MP5).இருப்பினும், ஒரு தளத்தில் உள்ள துகள்களின் அதிக செறிவுகள் (அதாவது, மூச்சுக்குழாயின் முதுகெலும்பு மேற்பரப்பு) ஒரு இரட்டை காந்த சாதனத்தைப் பயன்படுத்தி திரவ நிர்வாகத்திற்குப் பிறகு கண்டறியப்படவில்லை, இது பொதுவாக ஒரு காந்த சாதனத்தில் நிகழ்கிறது.பின்னர், எதிர் துருவங்களை விரட்ட ஒரு காந்தம் கட்டமைக்கப்பட்டபோது (படம் 3 சி), பார்வை புலத்தில் தெரியும் துகள்களின் எண்ணிக்கை பிரசவத்திற்குப் பிறகு அதிகரிக்கவில்லை.காந்தங்களை முறையே ஈர்க்கும் அல்லது தள்ளும் அதிக காந்தப்புல வலிமையின் காரணமாக இரண்டு காந்த அமைப்புகளையும் அமைப்பது சவாலானது.அமைப்பு பின்னர் காற்றுப்பாதைகளுக்கு இணையாக ஒற்றை காந்தமாக மாற்றப்பட்டது, ஆனால் 90 டிகிரி கோணத்தில் காற்றுப்பாதைகள் வழியாக செல்கிறது, இதனால் விசையின் கோடுகள் மூச்சுக்குழாய் சுவரை ஆர்த்தோகனலாக கடந்து சென்றன (படம் 3 டி), இது துகள் திரட்டலின் சாத்தியத்தை தீர்மானிக்க நோக்கமாக உள்ளது. பக்கவாட்டு சுவர்.கவனிக்கப்பட வேண்டும்.இருப்பினும், இந்த கட்டமைப்பில், அடையாளம் காணக்கூடிய MF குவிப்பு இயக்கம் அல்லது காந்த இயக்கம் இல்லை.இந்த அனைத்து முடிவுகளின் அடிப்படையில், மரபணு கேரியர்களின் விவோ ஆய்வுகளில் ஒரு காந்தம் மற்றும் 30 டிகிரி நோக்குநிலை கொண்ட கட்டமைப்பு தேர்வு செய்யப்பட்டது (படம் 3a).
மனிதாபிமான முறையில் பலியிடப்பட்ட உடனேயே விலங்கு பலமுறை படமெடுக்கப்பட்டபோது, ​​குறுக்கிடும் திசு இயக்கம் இல்லாததால், காந்தத்தின் மொழிபெயர்ப்பு இயக்கத்திற்கு ஏற்ப 'ஊசலாடுவது', தெளிவான இடைக் குருத்தெலும்பு புலத்தில் மெல்லிய, குறுகிய துகள் கோடுகளைக் கண்டறிய முடியும்.MP6 துகள்களின் இருப்பு மற்றும் இயக்கத்தை தெளிவாக பார்க்கவும்.
LV-LacZ இன் டைட்டர் 1.8 x 108 IU/mL, மற்றும் CombiMag MP (MP6) உடன் 1:1 கலந்த பிறகு, விலங்குகளுக்கு 9 x 107 IU/ml LV வாகனத்தின் (அதாவது 4.5) மூச்சுக்குழாய் டோஸின் 50 µl செலுத்தப்பட்டது. x 106 TU/எலி).)).இந்த ஆய்வுகளில், பிரசவத்தின்போது காந்தத்தை நகர்த்துவதற்குப் பதிலாக, காந்தப்புலம் இல்லாத நிலையில் வெக்டார் டெலிவரியுடன் ஒப்பிடும்போது எல்வி கடத்துதலை மேம்படுத்த முடியுமா மற்றும் (ஆ) காற்றுப்பாதையால் முடியுமா என்பதைத் தீர்மானிக்க காந்தத்தை ஒரு நிலையில் சரி செய்தோம். கவனம் செலுத்த வேண்டும்.மேல் சுவாசக் குழாயின் காந்த இலக்குப் பகுதிகளில் செல்கள் கடத்தப்படுகின்றன.
காந்தங்களின் இருப்பு மற்றும் எல்வி திசையன்களுடன் இணைந்து CombiMag இன் பயன்பாடு ஆகியவை விலங்குகளின் ஆரோக்கியத்தை மோசமாக பாதிக்கவில்லை, எங்கள் நிலையான LV திசையன் விநியோக நெறிமுறையைப் போலவே.இயந்திர குழப்பத்திற்கு உட்பட்ட மூச்சுக்குழாய் பகுதியின் முன் படங்கள் (துணை படம். 1) எல்வி-எம்பி சிகிச்சை குழு ஒரு காந்தம் (படம். 9a) முன்னிலையில் கடத்துதலின் குறிப்பிடத்தக்க அளவு அதிகமாக இருப்பதைக் காட்டுகிறது.கட்டுப்பாட்டுக் குழுவில் ஒரு சிறிய அளவு நீல LacZ கறை மட்டுமே இருந்தது (படம் 9b).X-Gal-கறை படிந்த இயல்பாக்கப்பட்ட பகுதிகளின் அளவீடு, காந்தப்புலத்தின் முன்னிலையில் LV-MP இன் நிர்வாகம் தோராயமாக 6 மடங்கு முன்னேற்றத்தை ஏற்படுத்தியது (படம். 9c).
காந்தப்புலத்தின் முன்னிலையிலும் (ஆ) காந்தம் இல்லாத நிலையில் எல்வி-எம்பி (அ) உடன் மூச்சுக்குழாய் கடத்தலைக் காட்டும் கூட்டுப் படங்களின் எடுத்துக்காட்டு.(இ) ஒரு காந்தத்தைப் பயன்படுத்தி மூச்சுக்குழாயில் LacZ கடத்துதலின் இயல்பாக்கப்பட்ட பகுதியில் புள்ளியியல் ரீதியாக குறிப்பிடத்தக்க முன்னேற்றம் (*p = 0.029, t-test, n = 3 per group, சராசரி ± நிலையான பிழை).
நடுநிலையான வேகமான சிவப்பு-கறை படிந்த பிரிவுகள் (உதாரணமாக துணை படம் 2 இல் காட்டப்பட்டுள்ளது) LacZ- படிந்த செல்கள் அதே மாதிரியில் மற்றும் முன்பு அறிவிக்கப்பட்ட அதே இடத்தில் இருப்பதைக் குறிக்கிறது.
காற்றுப்பாதை மரபணு சிகிச்சையில் முக்கிய சவாலானது ஆர்வமுள்ள பகுதிகளில் கேரியர் துகள்களின் துல்லியமான உள்ளூர்மயமாக்கல் மற்றும் காற்றோட்டம் மற்றும் செயலில் உள்ள சளி நீக்கம் ஆகியவற்றின் முன்னிலையில் மொபைல் நுரையீரலில் அதிக அளவிலான கடத்தும் திறனை அடைவது ஆகும்.சிஸ்டிக் ஃபைப்ரோஸிஸில் உள்ள சுவாச நோய்களுக்கான சிகிச்சைக்காக வடிவமைக்கப்பட்ட LV கேரியர்களுக்கு, கடத்தும் காற்றுப்பாதைகளில் கேரியர் துகள்கள் வசிக்கும் நேரத்தை அதிகரிப்பது இதுவரை அடைய முடியாத இலக்காக உள்ளது.காஸ்டெல்லானி மற்றும் பலர் சுட்டிக்காட்டியுள்ளபடி, கடத்துதலை மேம்படுத்த காந்தப்புலங்களைப் பயன்படுத்துவது எலக்ட்ரோபோரேஷன் போன்ற பிற மரபணு விநியோக முறைகளை விட நன்மைகளைக் கொண்டுள்ளது, ஏனெனில் இது எளிமை, பொருளாதாரம், உள்ளூர்மயமாக்கப்பட்ட விநியோகம், அதிகரித்த செயல்திறன் மற்றும் குறுகிய அடைகாக்கும் நேரம் ஆகியவற்றை இணைக்க முடியும்.மற்றும் வாகனத்தின் குறைந்த டோஸ் 10.எவ்வாறாயினும், வெளிப்புற காந்த சக்திகளின் செல்வாக்கின் கீழ் காற்றுப்பாதைகளில் உள்ள காந்தத் துகள்களின் விவோ படிவு மற்றும் நடத்தை விவரிக்கப்படவில்லை, உண்மையில் இந்த முறையானது அப்படியே வாழும் காற்றுப்பாதைகளில் மரபணு வெளிப்பாடு அளவை அதிகரிக்கும் திறன் vivo இல் நிரூபிக்கப்படவில்லை.
பிசிஎக்ஸ்ஐ சின்க்ரோட்ரானில் எங்களின் இன் விட்ரோ சோதனைகள், எம்பி பாலிஸ்டிரீனைத் தவிர, நாங்கள் சோதித்த அனைத்து துகள்களும் நாங்கள் பயன்படுத்திய இமேஜிங் அமைப்பில் தெரியும் என்பதைக் காட்டுகிறது.ஒரு காந்தப்புலத்தின் முன்னிலையில், காந்தப்புலங்கள் சரங்களை உருவாக்குகின்றன, அதன் நீளம் துகள்களின் வகை மற்றும் காந்தப்புலத்தின் வலிமை (அதாவது, காந்தத்தின் அருகாமை மற்றும் இயக்கம்) ஆகியவற்றுடன் தொடர்புடையது.படம் 10 இல் காட்டப்பட்டுள்ளபடி, ஒவ்வொரு தனித் துகளும் காந்தமாக்கப்பட்டு அதன் சொந்த காந்தப்புலத்தைத் தூண்டுவதால் நாம் கவனிக்கும் சரங்கள் உருவாகின்றன.இந்த தனித்தனி புலங்கள், மற்ற துகள்களின் ஈர்ப்பு மற்றும் விரட்டும் உள்ளூர் சக்திகளின் உள்ளூர் சக்திகளின் காரணமாக மற்ற ஒத்த துகள்களை சேகரித்து குழு சர இயக்கங்களுடன் இணைக்கின்றன.
(a, b) திரவத்தால் நிரப்பப்பட்ட நுண்குழாய்களுக்குள் உருவாகும் துகள்களின் சங்கிலிகள் மற்றும் (c, d) காற்று நிரப்பப்பட்ட மூச்சுக்குழாயைக் காட்டும் வரைபடம்.நுண்குழாய்கள் மற்றும் மூச்சுக்குழாய் அளவுகோலுக்கு இழுக்கப்படவில்லை என்பதை நினைவில் கொள்க.பேனல் (அ) சங்கிலிகளில் அமைக்கப்பட்ட Fe3O4 துகள்களைக் கொண்ட MF இன் விளக்கத்தையும் கொண்டுள்ளது.
காந்தம் தந்துகியின் மேல் நகரும் போது, ​​துகள் சரத்தின் கோணமானது Fe3O4 ஐக் கொண்ட MP3-5க்கான முக்கியமான நுழைவாயிலை அடைந்தது, அதன் பிறகு துகள் சரம் அதன் அசல் நிலையில் இருக்கவில்லை, ஆனால் மேற்பரப்பில் ஒரு புதிய நிலைக்கு நகர்ந்தது.காந்தம்.கண்ணாடி நுண்குழாய்களின் மேற்பரப்பு இந்த இயக்கத்தை அனுமதிக்கும் அளவுக்கு மென்மையாக இருப்பதால் இந்த விளைவு ஏற்பட வாய்ப்புள்ளது.சுவாரஸ்யமாக, MP6 (CombiMag) இவ்வாறு நடந்து கொள்ளவில்லை, ஒருவேளை துகள்கள் சிறியதாக இருந்ததாலும், வேறுபட்ட பூச்சு அல்லது மேற்பரப்பு மின்னேற்றம் இருந்ததாலும் அல்லது தனியுரிம கேரியர் திரவம் அவற்றின் நகரும் திறனை பாதித்திருக்கலாம்.CombiMag துகள் படத்தில் உள்ள மாறுபாடும் பலவீனமாக உள்ளது, இது திரவம் மற்றும் துகள்கள் ஒரே அடர்த்தியைக் கொண்டிருக்கலாம், எனவே அவை ஒன்றையொன்று நோக்கி எளிதில் நகர முடியாது.காந்தம் மிக வேகமாக நகர்ந்தால் துகள்களும் சிக்கிக்கொள்ளலாம், இது காந்தப்புல வலிமையானது திரவத்தில் உள்ள துகள்களுக்கு இடையிலான உராய்வை எப்பொழுதும் கடக்க முடியாது என்பதைக் குறிக்கிறது, காந்தப்புல வலிமை மற்றும் காந்தத்திற்கும் இலக்கு பகுதிக்கும் இடையே உள்ள தூரம் வரக்கூடாது என்று பரிந்துரைக்கிறது. ஆச்சரியம்.முக்கியமான.காந்தங்கள் இலக்குப் பகுதி வழியாகப் பாயும் பல நுண் துகள்களைப் பிடிக்க முடியும் என்றாலும், மூச்சுக்குழாயின் மேற்பரப்பில் காம்பிமேக் துகள்களை நகர்த்துவதற்கு காந்தங்கள் நம்பியிருக்க வாய்ப்பில்லை என்பதையும் இந்த முடிவுகள் குறிப்பிடுகின்றன.எனவே, vivo LV MF ஆய்வுகளில் காற்றுப்பாதை மரத்தின் குறிப்பிட்ட பகுதிகளை உடல் ரீதியாக குறிவைக்க நிலையான காந்தப்புலங்களைப் பயன்படுத்த வேண்டும் என்று நாங்கள் முடிவு செய்தோம்.
துகள்கள் உடலுக்குள் செலுத்தப்பட்டவுடன், உடலின் சிக்கலான நகரும் திசுக்களின் பின்னணியில் அவற்றை அடையாளம் காண்பது கடினம், ஆனால் MP சரங்களை "அசைக்க" மூச்சுக்குழாய் மீது கிடைமட்டமாக காந்தத்தை நகர்த்துவதன் மூலம் அவற்றின் கண்டறிதல் திறன் மேம்படுத்தப்பட்டுள்ளது.நிகழ்நேர இமேஜிங் சாத்தியம் என்றாலும், விலங்கு மனிதாபிமானமாகக் கொல்லப்பட்ட பிறகு துகள் இயக்கத்தைக் கண்டறிவது எளிது.இமேஜிங் பகுதிக்கு மேல் காந்தம் நிலைநிறுத்தப்பட்டபோது MP செறிவுகள் பொதுவாக இந்த இடத்தில் அதிகமாக இருக்கும், இருப்பினும் சில துகள்கள் பொதுவாக மூச்சுக்குழாய்க்கு கீழே காணப்படுகின்றன.விட்ரோ ஆய்வுகள் போலல்லாமல், ஒரு காந்தத்தின் இயக்கத்தால் துகள்களை மூச்சுக்குழாயின் கீழே இழுக்க முடியாது.இந்த கண்டுபிடிப்பு மூச்சுக்குழாயின் மேற்பரப்பை உள்ளடக்கிய சளி எவ்வாறு உள்ளிழுக்கும் துகள்களை எவ்வாறு செயலாக்குகிறது, அவற்றை சளியில் சிக்க வைத்து பின்னர் அவற்றை மியூகோ-சிலியரி கிளியரன்ஸ் பொறிமுறையின் மூலம் அழிக்கிறது.
ஈர்ப்பிற்காக மூச்சுக்குழலுக்கு மேலேயும் கீழேயும் உள்ள காந்தங்களைப் பயன்படுத்துவது (படம். 3b) காந்தப்புலத்தை விட ஒரே மாதிரியான காந்தப்புலத்தை ஏற்படுத்தும் என்று நாங்கள் அனுமானித்தோம்..எவ்வாறாயினும், எங்கள் ஆரம்ப ஆய்வில் இந்த கருதுகோளை ஆதரிக்க தெளிவான ஆதாரங்கள் கிடைக்கவில்லை.இதேபோல், ஒரு ஜோடி காந்தங்களை விரட்டுவதற்கு (படம் 3c) அமைப்பதால், படப் பகுதியில் அதிக துகள்கள் குடியேறவில்லை.இந்த இரண்டு கண்டுபிடிப்புகளும் இரட்டை-காந்த அமைப்பு MP பாயிண்டிங்கின் உள்ளூர் கட்டுப்பாட்டை கணிசமாக மேம்படுத்தவில்லை என்பதை நிரூபிக்கிறது, மேலும் இதன் விளைவாக வலுவான காந்த சக்திகள் டியூன் செய்வது கடினம், இந்த அணுகுமுறை குறைவான நடைமுறையை உருவாக்குகிறது.இதேபோல், மூச்சுக்குழாய்க்கு மேலேயும் குறுக்கேயும் காந்தத்தை நோக்குநிலைப்படுத்துவது (படம் 3d) படமெடுக்கப்பட்ட பகுதியில் மீதமுள்ள துகள்களின் எண்ணிக்கையை அதிகரிக்கவில்லை.இந்த மாற்று கட்டமைப்புகளில் சில வெற்றியடையாமல் போகலாம், ஏனெனில் அவை படிவு மண்டலத்தில் காந்தப்புல வலிமையைக் குறைக்கின்றன.இவ்வாறு, 30 டிகிரி (படம். 3a) இல் உள்ள ஒற்றை காந்த கட்டமைப்பு, vivo சோதனை முறையில் எளிமையான மற்றும் திறமையானதாகக் கருதப்படுகிறது.
LV-MP ஆய்வு, எல்வி திசையன்கள் CombiMag உடன் இணைக்கப்பட்டு, காந்தப்புலத்தின் முன்னிலையில் உடல்ரீதியாக தொந்தரவு செய்யப்பட்ட பிறகு வழங்கப்படும் போது, ​​கட்டுப்பாடுகளுடன் ஒப்பிடும்போது மூச்சுக்குழாயில் கடத்தும் அளவுகள் கணிசமாக அதிகரித்தன.சின்க்ரோட்ரான் இமேஜிங் ஆய்வுகள் மற்றும் LacZ முடிவுகளின் அடிப்படையில், காந்தப்புலம் எல்வியை மூச்சுக்குழாயில் வைத்திருக்க முடியும் மற்றும் நுரையீரலுக்குள் உடனடியாக ஆழமாக ஊடுருவிய திசையன் துகள்களின் எண்ணிக்கையைக் குறைக்கிறது.இத்தகைய இலக்கு மேம்பாடுகள் டெலிவரி டைட்டர்கள், இலக்கு அல்லாத கடத்தல், அழற்சி மற்றும் நோயெதிர்ப்பு பக்க விளைவுகள் மற்றும் மரபணு பரிமாற்ற செலவுகள் ஆகியவற்றைக் குறைக்கும் போது அதிக செயல்திறனுக்கு வழிவகுக்கும்.முக்கியமாக, உற்பத்தியாளரின் கூற்றுப்படி, பிற வைரஸ் திசையன்கள் (AAV போன்றவை) மற்றும் நியூக்ளிக் அமிலங்கள் உள்ளிட்ட பிற மரபணு பரிமாற்ற முறைகளுடன் இணைந்து CombiMag ஐப் பயன்படுத்தலாம்.